石楠組織培養(yǎng)和多倍體誘導(dǎo)的研究.pdf

1、石楠是一種優(yōu)良的園林綠化樹種。石楠組織培養(yǎng)研究的主要目的是探索石楠組織培養(yǎng)的快速繁殖體系和再生體系，旨在為抗凍基因轉(zhuǎn)化石楠的抗性育種工作提供材料及技術(shù)支持。石楠的組織培養(yǎng)以石楠的新梢莖段、種胚和葉片為材料，主要探討組織培養(yǎng)過程中各種最佳培養(yǎng)基、組織培養(yǎng)條件及組織培養(yǎng)過程中存在問題如外植體污染、褐化等問題的解決方法。石楠多倍體誘導(dǎo)研究以播種的石楠幼苗為材料，采用滴液的方法用秋水仙素水溶液處理石楠幼苗的生長點，對不同的處理方式、處理濃度和處

2、理時間的多倍體誘導(dǎo)效果進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究。主要研究結(jié)果有： 1.石楠莖段的最佳表面消毒方法：75％乙醇消毒30s+0.1％升汞7min；石楠初代培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為MS+BA2.0mg/l+NAA0.1mg/l,蔗糖30g/l，瓊脂7.5g/l。最佳增殖培養(yǎng)基是：MS+BA1.0mg/l+NAA0.1mg/l，在此種培養(yǎng)基上增殖芽生長快，葉綠，莖較粗，有較多次生芽發(fā)生，并且無玻璃化現(xiàn)象出現(xiàn)。在所試驗的培養(yǎng)基中BA濃度超過2.0m

3、g/l時，增殖苗中出現(xiàn)了玻璃化現(xiàn)象。 2.對莖段外植體來說，PVP、Vc、AC三種抗褐化劑中以PVP的抑制褐化的效果最好；以第2-3芽半木質(zhì)化的莖段為外植體要好于其它的莖段部位；5-8天的4℃低溫處理能夠很好的抑制莖段的褐化；降低大量元素用量也能有效的抑制石楠莖段的褐化；不同的取材季節(jié)對石楠的褐化有著顯著的影響，石楠莖段外植體以4-5月份及9月份褐化最輕。 3.石楠種胚消毒的最佳方案是：75％乙醇30s+0.1％升汞12

4、min；種子胚萌發(fā)的最佳培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基；去根實生苗增殖的最佳培養(yǎng)基為MS+BA1.0mg/l+NAA0.1mg/l。增殖苗最好的生根培養(yǎng)基是1/2MS+IBA0.2mg/l。 4.試驗中在所有添加TDZ和NAA的MS培養(yǎng)基上都出現(xiàn)了大量的愈傷組織。葉片再生芽的最佳培養(yǎng)基為：MS+TDZ0.5mg/l+NAA0.2mg/l。 5.采用芽苗滴液的方法誘導(dǎo)石楠多倍體植株是可行的。試驗共得到多倍體植株40棵。利用濃度為0.5