腫瘤上清液激活成纖維細(xì)胞后對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-A表達(dá)影響.pdf

1、目的：檢測(cè)腫瘤細(xì)胞上清液對(duì)成纖維細(xì)胞的激活的最佳濃度及最佳濃度的條件培養(yǎng)液激活成纖維細(xì)胞后血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF-A)的表達(dá)的變化規(guī)律。
　　方法：用MTT法和流式細(xì)胞凋亡術(shù)測(cè)定成纖維細(xì)胞在不同濃度條件培養(yǎng)液中的生長(zhǎng)變化與凋亡率。用RT-PCR，Western blot，免疫組化檢測(cè)成纖維細(xì)胞的α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)與VEGF-A的表達(dá)。
　　結(jié)果：MTT法發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞上清液與2×DMEM：F12比例為1:1時(shí)

2、，對(duì)成纖維細(xì)胞的生長(zhǎng)有明顯的促進(jìn)作用，其生長(zhǎng)速度快于其它濃度(P<0.05)。流式細(xì)胞凋亡術(shù)檢測(cè)表明隨著腫瘤細(xì)胞上清液濃度的提高，成纖維細(xì)胞的凋亡率也上升，1:1的凋亡率與1.5:1時(shí)有差異(P<0.05)。腫瘤細(xì)胞上清液組成的條件培養(yǎng)基能促進(jìn)成纖維細(xì)胞α-SMA與VEGF-A穩(wěn)定的表達(dá)，二者在培養(yǎng)后第1天都開始表達(dá)，第3天表達(dá)量達(dá)到峰值，第三天以后表達(dá)穩(wěn)定。
　　結(jié)論：當(dāng)腫瘤細(xì)胞上清液與2×DMEM：F12比例為1:1時(shí)，能有效