原花青素對順鉑誘導的HEi-OC1聽細胞損傷的保護作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：探討原花青素(OPC)對順鉑(DDP)引起的HEI-OC1聽細胞損傷的保護作用及機制。
　　方法：實驗分為正常對照組，單加保護藥組，順鉑損傷組，順鉑損傷加藥保護組。正常組細胞不加入任何藥物，僅單純更換細胞培養(yǎng)液;單加保護藥組細胞，加入不同劑量(5umol，10umol/L)的原花青素，由DMEM稀釋，作用24h;順鉑損傷組細胞加入20umol/L濃度順鉑，由DMEM稀釋，作用24h;加藥保護組細胞預先加入不同濃度原花青素作用

2、12h，而后棄上清液，再加入20umol/L濃度順鉑作用24h。采用MTT法檢測細胞存活率改變并在光鏡下觀察。利用Hoechst33258染色在熒光顯微鏡下觀察細胞凋亡情況。流式細胞術(shù)檢測HEI-OC1聽細胞內(nèi)活性氧(ROS)含量的改變。Real-time PCR檢測促凋亡因子bax、抗凋亡因子bcl-2 mRNA表達水平的變化。Western blotting檢測cleaved Caspase-3、Caspase-8凋亡蛋白表達水平的

3、改變。
　　結(jié)果：與順鉑損傷組相比，預先加入OPC組MTT檢測及光鏡下觀察到細胞的存活率升高;Hoechst33258染色顯示細胞凋亡率降低（p＜0.05）;細胞內(nèi)ROS含量顯著降低(p＜0.01);bax mRNA表達水平降低，bcl-2 mRNA表達水平升高（p＜0.05）;凋亡蛋白cleaved Caspase-3、Caspase-8表達明顯降低(p＜0.05)。
　　結(jié)論：OPC對順鉑誘導的HEI-OC1聽細胞的凋亡

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