原花青素對順鉑誘導的HEi-OC1聽細胞損傷的保護作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探討原花青素(OPC)對順鉑(DDP)引起的HEI-OC1聽細胞損傷的保護作用及機制。
  方法:實驗分為正常對照組,單加保護藥組,順鉑損傷組,順鉑損傷加藥保護組。正常組細胞不加入任何藥物,僅單純更換細胞培養(yǎng)液;單加保護藥組細胞,加入不同劑量(5umol,10umol/L)的原花青素,由DMEM稀釋,作用24h;順鉑損傷組細胞加入20umol/L濃度順鉑,由DMEM稀釋,作用24h;加藥保護組細胞預先加入不同濃度原花青素作用

2、12h,而后棄上清液,再加入20umol/L濃度順鉑作用24h。采用MTT法檢測細胞存活率改變并在光鏡下觀察。利用Hoechst33258染色在熒光顯微鏡下觀察細胞凋亡情況。流式細胞術(shù)檢測HEI-OC1聽細胞內(nèi)活性氧(ROS)含量的改變。Real-time PCR檢測促凋亡因子bax、抗凋亡因子bcl-2 mRNA表達水平的變化。Western blotting檢測cleaved Caspase-3、Caspase-8凋亡蛋白表達水平的

3、改變。
  結(jié)果:與順鉑損傷組相比,預先加入OPC組MTT檢測及光鏡下觀察到細胞的存活率升高;Hoechst33258染色顯示細胞凋亡率降低(p<0.05);細胞內(nèi)ROS含量顯著降低(p<0.01);bax mRNA表達水平降低,bcl-2 mRNA表達水平升高(p<0.05);凋亡蛋白cleaved Caspase-3、Caspase-8表達明顯降低(p<0.05)。
  結(jié)論:OPC對順鉑誘導的HEI-OC1聽細胞的凋亡

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