電針促進(jìn)GDNF和N-cadherin介導(dǎo)的兔面神經(jīng)元保護(hù)及周圍面神經(jīng)再生的實驗研究.pdf

1、目的：研究膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)和神經(jīng)鈣粘素（N-cadherin）在兔周圍面神經(jīng)壓榨性損傷后對中樞面神經(jīng)元的作用及兩者的相關(guān)性，探討電針促進(jìn)面神經(jīng)損傷后再生修復(fù)的可能機(jī)制，為電針治療面神經(jīng)損傷的有效性提供理論依據(jù)，并促進(jìn)其推廣應(yīng)用。
　　方法：選用由西南醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供的成年健康的99只新西蘭大白兔，隨機(jī)分成正常組（9只，不做任何處理和治療）、模型組（45只，制作右側(cè)面神經(jīng)上頰支壓榨性損傷的病理模型，但不做

2、治療，任其自愈）、電針組（45只，造模后2小時即開始穴位電針治療，每天1次，每次時長30分鐘）；模型組和電針組又按照術(shù)后取材時間點分為5組。觀察電針右側(cè)“翳風(fēng)”“頰車”“四白”“地倉”“陽白”“顴髎”及“合谷”埋針對實驗動物行為學(xué)的影響。正常組直接取材，模型組和電針組分別于術(shù)后1、4、7、14、21天取動物腦橋中下部新鮮面神經(jīng)元組織、右側(cè)面神經(jīng)、右側(cè)頰肌組織，分別進(jìn)行尼氏染色、甲苯胺藍(lán)染色、HE的組織形態(tài)學(xué)觀察，并采用Real-time

3、 PCR和 Western blot方法檢測正常組、模型組和電針組各時間點面神經(jīng)元組織中 GDNF和 N-cadherin核酸和蛋白的定量表達(dá)，進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析并比較兩個分子表達(dá)的相關(guān)性。
　　結(jié)果：正常面神經(jīng)元中，GDNF的表達(dá)高于 N-cadherin。周圍性面神經(jīng)壓榨損傷后，從動物行為學(xué)觀察，電針組面肌功能在觀察期內(nèi)較模型組明顯恢復(fù)，但功能恢復(fù)均不完全。從組織形態(tài)學(xué)上看，電針組面神經(jīng)元從術(shù)后4天進(jìn)入明顯反應(yīng)期，術(shù)后7天開始進(jìn)入

4、恢復(fù)期，而面神經(jīng)頰支炎性反應(yīng)在術(shù)后14天開始明顯減輕，頰肌組織術(shù)后21天出現(xiàn)恢復(fù)趨勢，均較模型組提前。從 mRNA水平的表達(dá)來看，電針組和模型組中 GDNF和 N-cadherin兩個分子的表達(dá)趨勢基本一致，先上升再下降，進(jìn)入恢復(fù)期后再上升。但電針組較模型組提前進(jìn)入恢復(fù)期，電針組在術(shù)后7天，模型組在術(shù)后14天開始上調(diào)表達(dá)，且在術(shù)后每個時間點，始終存在電針組高于模型組、正常組高于模型組的表達(dá)規(guī)律。兩組的表達(dá)， N-cadherin mRN

5、A除術(shù)后1天，GDNF mRNA除術(shù)后1天和術(shù)后21天，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.001）。除術(shù)后1天，GDNF mRNA在兩組的表達(dá)以及N-cadherin mRNA在兩組的表達(dá)，表達(dá)趨勢具有相關(guān)性，秩相關(guān)系數(shù) rs=0.772，P《0.001。從蛋白水平的表達(dá)來看，電針組和模型組中GDNF和 N-cadherin兩個分子的表達(dá)變化亦基本一致，先下降再上升。電針組N-cadherin蛋白水平在術(shù)后下降至最低水平后即刻開始緩慢上升，

6、GDNF蛋白水平在術(shù)后4天開始迅速上升；而模型組N-cadherin蛋白水平在術(shù)后14天開始上升，GDNF蛋白水平在術(shù)后7天開始上升。GDNF和N-cadherin在電針組和模型組蛋白水平的表達(dá)在術(shù)后每個時間點的差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.001）。除術(shù)后21天，GDNF在兩組的表達(dá)以及N-cadherin在兩組的表達(dá)，表達(dá)趨勢具有相關(guān)性，秩相關(guān)系數(shù) rs=0.660， P《0.001。
　　結(jié)論：1，電針可以促進(jìn)兔面神經(jīng)外周部