面神經(jīng)損傷后MnTBAP對(duì)面神經(jīng)元的保護(hù)作用.pdf

1、面神經(jīng)顱外段走行距離較長(zhǎng)，與腮腺等器官關(guān)系密切，隨著耳外科、腫瘤以及包括機(jī)械性損傷、物理化學(xué)性損傷、醫(yī)源性損傷在內(nèi)的創(chuàng)傷性面神經(jīng)節(jié)段損傷正處于上升趨勢(shì)，發(fā)生率約為17-32％。面神經(jīng)損傷后不僅導(dǎo)致頜面部畸形，而且會(huì)影響到口、眼等的功能，從生理、心理、社會(huì)等方面給患者造成不良影響。因此，面神經(jīng)損傷的修復(fù)是相關(guān)領(lǐng)域重要的研究課題之一。月前臨床上雖然采用精細(xì)的顯微外科技術(shù)以較好地恢復(fù)神經(jīng)的連續(xù)性，但神經(jīng)功能的恢復(fù)仍不令人滿意。當(dāng)面神經(jīng)受到損傷

2、后，神經(jīng)體液微循環(huán)發(fā)生紊亂，從而引起糖皮質(zhì)激素水平急劇升高、氧化應(yīng)激產(chǎn)物大量產(chǎn)生、細(xì)胞因子（Cytokine）大量釋放及胞內(nèi)離子變化、神經(jīng)元通過(guò)軸漿逆性運(yùn)輸靶組織或支持組織所產(chǎn)生的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（NTF）中斷等，最終線粒體膜損傷，細(xì)胞色素C（Cyto-c）釋放。Cyto-c在有ATP的參與下活化凋亡活化因子（Apaf-1），活化的Apaf-1經(jīng)其caspase補(bǔ)允結(jié)構(gòu)域（CARD）與caspase-9前體原結(jié)構(gòu)域結(jié)合，導(dǎo)致caspase-

3、9自身活化。Cyto-C、Apaf-1與caspase-9前體組成“凋亡體”（apotosome），活化的caspase-9進(jìn)一步誘導(dǎo)效應(yīng)caspase如caspase-3的活化引起細(xì)胞凋亡。本研究目的旨在觀察MnTBAP（Mn（Ⅱ）tetrakis（4-Benzoic acid）porphyrin chloride）對(duì)大鼠面神經(jīng)總干壓榨傷的保護(hù)作用及對(duì)TUNEL、Cyto-c、Caspase-9、Caspase-3表達(dá)的影響。

4、　　 方法：
　　 選取SD大鼠40只，體質(zhì)量250～300 g之間，雌雄不限，手術(shù)制作大鼠雙側(cè)面神經(jīng)總干壓榨傷模型，左側(cè)損傷局部給予MnTBAP，右側(cè)損傷局部給予鹽水作為對(duì)照，假手術(shù)組僅暴露雙側(cè)面神經(jīng)總干而不損傷神經(jīng)。分別在術(shù)后1、3、7、14、28、42d，大體觀察大鼠面癱恢復(fù)情況；HE染色的方法觀測(cè)術(shù)后各期面神經(jīng)元的形態(tài)學(xué)變化；原位末端標(biāo)記（TUNEL）法檢測(cè)神經(jīng)元胞體的凋亡；免疫組化染色檢測(cè)面神經(jīng)元Cyto-c、Cas

5、pase-9、Caspase-3蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 MnTBAP對(duì)總干壓榨傷后的面神經(jīng)有明顯的功能恢復(fù)作用；傷后第3d開(kāi)始MnTBAP側(cè)和對(duì)照側(cè)面神經(jīng)元存活率逐漸下降，第7d開(kāi)始MnTBAP側(cè)面神經(jīng)元存活率明顯高于對(duì)照側(cè)；傷后第7d開(kāi)始MnTBAP側(cè)和對(duì)照側(cè)可見(jiàn)TUNEL陽(yáng)性表達(dá)，第14d數(shù)量達(dá)到高峰，各時(shí)間點(diǎn)表達(dá)水平MnTBAP側(cè)較對(duì)照側(cè)低；傷后第1d，Cyto-c、Caspase-9陽(yáng)性表達(dá)增加，第7d時(shí)