PPARγ在人食管鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及其生物學(xué)意義.pdf

1、目的:食管癌是人類常見的消化道惡性腫瘤之一，全世界每年約有30萬人死于食管癌。其發(fā)病率和死亡率各國差異很大。我國是世界食管癌高發(fā)地，其死亡率占全球的50％以上，粗死亡率為17.38/10萬，占總癌亡人數(shù)的16.41％。食管癌的病理類型主要分為鱗狀細(xì)胞癌、腺癌、癌肉瘤、肉瘤樣癌及小細(xì)胞癌。其中我國以鱗狀細(xì)胞癌為主，約占發(fā)病率的90％左右。
　　過氧化物酶體增殖物激活受體(peroxisome proliferator activat

2、edreceptors，PPARs)被證實是核受體超家族的成員之一，是一類能與DNA應(yīng)答元件(DNA-respective element)結(jié)合的配體激活性轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，其主要功能是對與細(xì)胞生長和分化相關(guān)的基因表達(dá)特異性的調(diào)控。PPARγ是過氧化物酶體增殖物激活受體中研究最為廣泛的亞型。近來研究已證實，PPARγ在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮著抑制腫瘤細(xì)胞增殖、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞分化、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡及抑制腫瘤血管生成等重要作用。
　　本實驗采

3、用免疫組織化學(xué)法(IHC)及實時定量PCR(RT-PCR)檢測了PPARγ在人食管鱗狀細(xì)胞癌組織及其相應(yīng)遠(yuǎn)癌組織（距癌組織邊緣5cm以上）中的表達(dá)情況，分析了其與食管癌臨床病理各指標(biāo)間的關(guān)系，探討了其在食管鱗狀細(xì)胞癌表達(dá)的意義，為PPARγ激動劑應(yīng)用于腫瘤的臨床治療提供理論基礎(chǔ)及實驗依據(jù)。
　　方法:收集河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院胸外科在2013年2月-2013年12月期間經(jīng)手術(shù)治療的食管鱗狀細(xì)胞癌患者新鮮組織標(biāo)本55例，其中男性患者3

4、3例，女性患者22例，男女比為1.5/1，病人平均年齡為62.3歲。食管胸上段癌6例，中段癌32例，下段癌17例;高分化4例，中分化38例，低分化13例。所有患者術(shù)前均未進(jìn)行放療及化療;術(shù)后均經(jīng)病理證實。對照組選取這55例患者的新鮮遠(yuǎn)癌組織標(biāo)本（距癌組織邊緣5cm以上）。分別記錄患者性別、年齡、病理類型、分化程度、TNM分期、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床病理情況。采用免疫組織化學(xué)法與實時定量PCR法，檢測實驗組和對照組標(biāo)本中PPARγ蛋白及mR

5、NA的表達(dá)水平，分析其與食管癌臨床病理特征的關(guān)系。采用SPSS13.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，通過卡方檢驗統(tǒng)計分析PPARγ蛋白在食管癌組織和遠(yuǎn)癌組織中的表達(dá)情況及與食管鱗癌各臨床病理特征之間的關(guān)系。通過Wilcoxon符號秩和檢驗分析食管癌組織和遠(yuǎn)癌組織中PPARγmRNA的表達(dá)情況，Wilcoxon符號秩和檢驗或Kruskal-WallisH檢驗分析食管癌組織中PPARγmRNA表達(dá)與臨床病理特征之間的關(guān)系。檢測結(jié)果以P＜0.05為

6、差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　1免疫組織化學(xué)檢測結(jié)果
　　1.1 PPARγ蛋白在食管鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)
　　PPARγ蛋白表達(dá)于細(xì)胞核和/或細(xì)胞漿中，以細(xì)胞核和/或細(xì)胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕色或棕黃色顆粒為陽性。PPARγ蛋白在食管癌組織中低表達(dá)，在遠(yuǎn)癌組織中高表達(dá)。實驗數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計示:PPARγ蛋白在食管癌組織中的陽性表達(dá)率為49.09％，遠(yuǎn)癌組織中陽性表達(dá)率為80.00％。統(tǒng)計學(xué)分析顯示，兩者的表達(dá)有差異，且差

7、異具有顯著性（x2=11.481，P＜0.05）。
　　1.2 PPAR蛋白的表達(dá)與食管鱗狀細(xì)胞癌臨床病理特征之間的關(guān)系
　　研究顯示55例食管癌組織中PPARγ蛋白陽性表達(dá)共27例，總的陽性表達(dá)率為49.09％。分布為:男性59.26％，女性40.74％;年齡60歲以上包括60歲患者59.26％，60歲以下患者40.74％;腫瘤位于食管上段者7.41％，中段者62.96％，下段者29.63％;低分化者25.93％，中分化者

8、62.96％，高分化者11.11％;Ⅰ期患者18.52％，Ⅱ期患者59.26％，Ⅲ期患者22.22％;無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者74.07％，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者25.93％。統(tǒng)計學(xué)分析顯示，PPARγ蛋白的表達(dá)與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況（x2=13.245，P＜0.05）及TNM分期(x2=13.713，P＜0.05)有關(guān)，而與患者性別、年齡、腫瘤部位及腫瘤分化程度無關(guān)。
　　2 RT-PCR檢測結(jié)果
　　2.1 PPARγmRNA在食管鱗狀細(xì)胞

9、癌組織中的表達(dá)
　　通過RT-PCR技術(shù)能夠在55例食管鱗狀細(xì)胞癌組織及其相應(yīng)的遠(yuǎn)癌組織中檢測到PPARγmRNA。與遠(yuǎn)癌組織粘膜相比(3.32)，在食管鱗狀細(xì)胞癌組織粘膜中PPARγmRNA的表達(dá)水平明顯降低(1.00)(P＜0.05)。
　　2.2 PPARmRNA的表達(dá)與食管鱗狀細(xì)胞癌臨床病理特征之間的關(guān)系
　　在臨床病理研究中，食管癌組織中的PPARγmRNA相對表達(dá)量與腫瘤的TNM分期(P=0.041)及分化

10、程度（P=0.007）有關(guān)(P＜0.05)，而與患者性別、年齡、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況及腫瘤部位無關(guān)(P＞0.05）。
　　結(jié)論:
　　1 PPARγ蛋白在人食管鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)較遠(yuǎn)癌組織顯著降低，且與腫瘤的TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況有關(guān)，而與患者性別、年齡、腫瘤分化程度及腫瘤部位無關(guān)。PPARγ蛋白表達(dá)水平隨著TNM分期遞進(jìn)而降低;無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中表達(dá)量明顯高于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組。
　　2 PPARγmRNA在人食管鱗狀細(xì)胞癌