水飛薊的基源鑒定與質(zhì)量評價及其miRNA的分析.pdf

1、水飛薊(Silybum Marianum(L.) Gaertn.)是菊科水飛薊屬草本植物，具有極高的藥用價值，其種子被用來提取水飛薊素。水飛薊素是多種臨床藥物的主要成分，常用于急慢性型肝炎、病毒性肝炎等多種疾病的輔助治療，近年來研究發(fā)現(xiàn)水飛薊素具有抗腫瘤活性，已經(jīng)進(jìn)入臨床試用階段。本文以多批次不同產(chǎn)地的水飛薊種子為研究對象，采用性狀鑒定、顯微鑒定、DNA條形碼鑒定和高效液相鑒定等不同方法對水飛薊樣品進(jìn)行了基源鑒定研究和分析;采用干燥法、

2、熾灼法、熱浸法等方法測定水飛薊樣品的水分、灰分、浸出物、外來有機(jī)物的含量;利用原子吸收光譜對測定水飛薊樣品的重金屬含量，利用高效液相法對水飛薊樣品中的主要藥用成分的含量進(jìn)行測定，并根據(jù)上述測定的指標(biāo)成分進(jìn)行綜合質(zhì)量評價研究;最后本論文以水飛薊的莖、葉、花為研究對象，采用高通量測序法，建立了水飛薊莖、葉、花組織的small RNA數(shù)據(jù)庫，并對水飛薊不同組織的保守miRNA和新的miRNA進(jìn)行鑒定和分析。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴通

3、過性狀鑒定、顯微鑒定、DNA條形碼鑒定和高效液相鑒定四種方法對分別采集于內(nèi)蒙古自治區(qū)、黑龍江省和遼寧省等地的10個批次的水飛薊樣品進(jìn)行基源鑒定分析，結(jié)果表明:四種方法均能夠鑒別中藥材水飛薊，其中性狀鑒定法更為簡便，而DNA條形碼技術(shù)和高效液相法準(zhǔn)確性更高。⑵對水飛薊樣品的水分、灰分、浸出物、外來有機(jī)物含量進(jìn)行測定，其中10個批次水飛薊樣品的平均水分含量為6.67％，灰分平均含量為4.97％，浸出物的平均含量為29.3％，外來有機(jī)物的平均

4、含量為1.39％，均符合中國藥典和美國藥典規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)。對水飛薊樣品中的重金屬含量進(jìn)行測定，其中鉛(Pb)的平均含量為0.099 mg/kg，砷(As)的平均含量為0.258 mg/kg，鎘(Cd)的平均含量為0.093 mg/kg，鉻(Cr)的平均含量為0.135 mg/kg，銅(Cu)的平均含量為18.89 mg/kg，除銅以外，鉛、鎘、鉻、砷的含量均符合美國藥典的標(biāo)準(zhǔn)。對水飛薊素、水飛薊賓、異水飛薊賓、水飛薊寧、水飛薊亭的含量進(jìn)行測

5、定，其中水飛薊素的平均含量為3.179％，符合美國藥典規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，水飛薊賓的平均含量為1.034％，均符合中國藥典規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，異水飛薊賓的平均含量為0.066％，水飛薊亭的平均含量0.063％，水飛薊寧的平均含量為0.035％。對上述指標(biāo)成分進(jìn)行主成分分析得到累積貢獻(xiàn)率為65.9％的三種主成分，其中主成分1中貢獻(xiàn)率最高的為水飛薊素、水飛薊賓和異水飛薊賓的含量，說明這幾種成分的含量可以作為水飛薊的特征性成分進(jìn)行研究。⑶對水飛薊的莖、葉、花