生姜化學成分和水飛薊賓衍生物的分析與活性評價.pdf

1、天然產(chǎn)物研究已經(jīng)成為發(fā)現(xiàn)創(chuàng)新藥物的重要來源之一。本文在本實驗室前期工作基礎上，對我國云南省羅平產(chǎn)生姜的化學成分進行了進一步研究，并對13種生姜化學成分的抗氧化和細胞毒性等進行了評價；另外，對16種2，3-脫氫水飛薊賓系列結(jié)構(gòu)修飾物的抗氧化活性等進行了研究。
　　 一、生姜中化學成分的鑒定和生物活性評價
　　 生姜為姜科植物Zingiber officinale Roscoe的根莖，在全世界作為藥用的歷史悠久，其在我國中藥

2、處方中也經(jīng)常在列。生姜主要用于治療關(guān)節(jié)炎、風濕病、嘔吐、十二指腸和胃潰瘍、扭傷、肌肉痛、疼痛、喉嚨痛、便秘、消化不良、高血壓、老年癡呆、發(fā)熱、感染性疾病和蠕蟲病等。生姜的植物化學研究已經(jīng)鑒定出許多具有生物活性的化合物，如姜辣素、姜二酮類、姜烯酚和二苯基庚烷類等；其中二苯基庚烷類化學成分具有抑制前列腺素和白三烯合成生物的活性，以及抗真菌、抗氧化和預防癌癥等生物活性。
　　 通過對云南省羅平產(chǎn)生姜的深入植物化學研究，采用色譜技術(shù)分離

3、和純化了14個化合物；應用核磁共振波譜(1H NMR，13C NMR和DEPT)、質(zhì)譜(EI-MS，ESI-MS＆HR-ESI-MS)、紅外光譜、元素分析、旋光測定等技術(shù)，鑒定了所獲得化合物的結(jié)構(gòu)，其中發(fā)現(xiàn)3個二苯基庚烷類和1個單萜類新化合物，分別為5-[4-羥基-6-(4-羥基苯乙基)四氫-2H-吡喃-2]-3-甲氧苯基-1，2-二醇(5-[4-hydroxy-6-(4-hydroxyphenethyl)tetrahydro-2H-p

4、yran-2-yl]-3-methoxybenzene-1，2-diol)、一對對映體：(E)-7-羥基-1，7-雙(4-羥基苯基)庚烷-5-烯3S磺酸鈉(Sodium(E)-7-hydroxy-1，7-bis(4-hydroxyphenyl)hept-5-ene-3S-sulfonate)和(E)-7-羥基-1，7-雙(4-羥基苯基)庚烷-5-烯-3R-磺酸鈉(sodium(E)-7-hydroxy-1，7-bis(4-hydroxy

5、phenyl)hept-5-ene-3R-sulfonate)、羥基桉-10-0-β-D葡萄糖苷(Hydroxycineole-10-0-β-D-glucopyranoside)。
　　 應用清除超氧陰離子自由基和抑制肝微粒體中過氧化脂質(zhì)的形成之體外模型，對我們實驗室分離獲得的化合物的抗氧化活性進行了評價。為了考察這些化合物在更接近生理條件下的抗氧化特性，應用大鼠的肝臟分離原代培養(yǎng)細胞模型，進一步檢測了化合物抑制叔丁基過氧化氫引

6、起氧化損傷的活性。為了評價化合物的抗腫瘤活性，在9種體外培養(yǎng)腫瘤細胞株上，測定了它們的細胞毒性。這9種腫瘤細胞株包括KB細胞，BEL7404細胞，P388Dl細胞，K562細胞，HL-60細胞，A549細胞，Hela細胞，CNE細胞，及PC-3細胞。在供試驗的化合物中，大部分化合物對吩嗪甲基硫酸鹽-NADH系統(tǒng)顯示出強效的超氧陰離子自由基的清除能力。在更接近生物體條件的系統(tǒng)，這些化合物在鼠肝微粒體暴露于氧化條件之試驗中，顯示出對肝臟脂質(zhì)

7、過氧化，具有強的保護作用。另外，我們還發(fā)現(xiàn)這些化合物對原代培養(yǎng)大鼠肝細胞接觸氧化損傷具有細胞保護活性。二苯基庚烷類化學成分在上述所有實驗中，顯示出有效的抗氧化生物活性。另一方面，實驗也表明：這些化合物多數(shù)對腫瘤細胞不具備明顯的細胞毒性。
　　 二、脫氫水飛薊賓衍生物的抗氧化生物活性研究
　　 2，3-脫氫水飛薊賓(2，3-Dehydrosilybin，DHS)，一種天然水飛薊賓的衍生物，存在于水飛薊中的濃度相當?shù)?。不象?/p>

8、飛薊賓，DHS的生物學研究非常有限，部分原因是其產(chǎn)率低和水溶性差(即低于水飛薊賓)。然而，最近的研究報告表明，DHS具有非常強的抗氧化活性，其活性高于水飛薊賓。因此，我們實驗室對DHS進行了一系列結(jié)構(gòu)修飾，本文對所有合成的16個DHS衍生物，以及水飛薊賓和DHS的藥理學活性進行了研究，包括2，2-二苯基-1-苦基肼(DPPH)、O2-氧自由基清除試驗和抗脂質(zhì)過氧化抑制試驗、對抗過氧化氫誘導PC12細胞毒性的神經(jīng)保護試驗，以期獲得更全面的

9、有關(guān)DHS衍生物在體外對抗氧化損傷所造成的神經(jīng)元損傷的有效性數(shù)據(jù)。我們還采用亞鐵離子(Fc2+)螯合模型評價DHS類似物的生物學性質(zhì)，以確定不同模型DHS類似物在AD和PD治療中的抗氧化活性。研究結(jié)果表明，極性強的化合物，如C7-OH和C20-OH雙醚以及C7-OH單醚具有脂肪族取代的乙酰胺，具有非常好的抑制脂質(zhì)過氧化活性和Fe2+離子的螯合效價.相反，C7- OH和C20-OH雙.烯丙基醚對過氧化氫誘導損傷PC12細胞的保護作用比槲皮