茶氯香酰胺脂質體的制備及抗乳腺癌活性的研究.pdf

1、實驗目的：脂質體作為一種靶向藥物載體，具有類似細胞的結構，在體內可以改變被包封藥物的分布，并具有緩釋效果，從而減少藥物的劑量和降低藥物的毒性，提高藥物的治療指數，為提高本實驗室已合成的新化合物茶氯香酰胺(TClC)的溶解性，增加其在體內外藥效和提高生物利用度，本研究賦予其脂質體劑型(TClC-L)。此外，為進一步提高腫瘤抑制作用，實驗設計茶氯香酰胺與順鉑聯(lián)合應用。鑒于順鉑(DDP)屬周期非特異性抗癌藥，抗瘤譜較廣，但在體內的毒性較大，為

2、進一步提高其抗腫瘤活性，本研究還制備了茶氯香酰胺與順鉑復方脂質體（TClC+DDP-L），評估了DDP-L（順鉑脂質體）和 TClC+DDP-L對人乳腺癌MCF-7細胞生長和遷移的影響，探索了它們作用的分子機制。
　　實驗方法：
　　1.采用薄膜分散法方法分別制備TClC-L，DDP-L和 TClC+DDP-L，對制備的脂質體處方工藝進行了研究和質量評價；
　　2.通過MTT法檢測TClC-L，DDP-L和 TClC+

3、DDP-L對人乳腺癌MCF-7細胞生長的影響；
　　3.使用流式細胞術檢測TClC-L，DDP-L和 TClC+DDP-L對人乳腺癌MCF-7細胞凋亡的影響；
　　4.用Transwellchamber法觀察TClC-L，DDP-L和 TClC+DDP-L對人乳腺癌MCF-7細胞遷移的影響；
　　5.應用蛋白印跡技術檢測TClC-L，DDP-L和 TClC+DDP-L對人乳腺癌MCF-7細胞中與生長和遷移相關的蛋白的表

4、達影響，并研究了藥物可能作用的分子機制；
　　實驗結果：
　　1.得到了TClC-L，DDP-L和 TClC+DDP-L，脂質體質量評估符合實驗要求。
　　2. MTT結果表明：三種脂質體 TClC-L，DDP-L和 TClC+DDP-L對人乳腺癌MCF-7細胞的生長均表現出抑制作用，同劑量下細胞給藥TClC+DDP-L抑制作用更加顯著，并呈現出顯著的劑量—時間依賴關系。
　　3.流式細胞術分析顯示：三種脂質體T

5、ClC-L，DDP-L和 TClC+DDP-L均可促進人乳腺癌MCF-7細胞發(fā)生凋亡。
　　4.Transwellchamber檢測結果表明：三種脂質體TClC-L，DDP-L和 TClC+DDP-L均可以降低人乳腺癌MCF-7細胞的遷移能力。
　　5.蛋白印跡法結果表明：三種脂質體TClC-L，DDP-L和 TClC+DDP-L均能夠上調抑制生長和誘導凋亡的相關蛋白因子Bax、PARP-1和caspase-3的表達水平，下

6、調促進生長和遷移以及抗凋亡的相關蛋白因子 VEGFR1、VEGFR2、Bcl-2、Akt和ER-α蛋白的表達水平。
　　實驗結論： TClC-L，DDP-L和 TClC+DDP-L均對人乳腺癌MCF-7細胞的生長和遷移有顯著的抑制作用，TClC+DDP-L的抑制作用最強；促進腫瘤細胞凋亡、抑制腫瘤細胞生長和遷移可能是其作用重要的分子機制，其中涉及到的蛋白因子包括Bcl-2、Bax、PARP-1、caspase-3、VEGFR1、V