雙丹脂質(zhì)體凝膠劑的制備及抗增生性瘢痕研究.pdf

1、增生性瘢痕是燒傷、術后和外傷后的常見疾病，嚴重者會影響體表美觀并導致患者的機體功能障礙和心理障礙。現(xiàn)代治療增生性瘢痕多用激素、激光、冷凍、手術等治療方法，往往伴隨副作用。中醫(yī)藥對瘢痕的防治有久遠的歷史，但存在用藥途徑比較單一、劑型有限等諸多問題，若將傳統(tǒng)中藥開發(fā)成現(xiàn)代制劑，可為中藥應用于瘢痕治療提供一種新思路。瘢痕即為中醫(yī)的“血瘀癥”，臨床治療多采用活血化瘀、通絡散結之品。由丹參和牡丹皮兩味中藥組成的“雙丹方”是活血化瘀的經(jīng)典藥方，可對

2、增生性瘢痕對癥治療。本課題設計將雙丹方的主要有效成分丹參酮ⅡA、丹參素、丹皮酚這三種能抑制增生性瘢痕的有效單體制成一種新的復方制劑，即雙丹脂質(zhì)體凝膠劑（SD-Lip Gels），為臨床上中藥瘢痕成方制劑的研制做新的嘗試。
　　目的:
　　研制SD-Lip Gels，優(yōu)化處方和制備工藝，考察其體外透皮特性，并進行雙丹脂質(zhì)體凝膠劑的抗兔耳增生性瘢痕作用和經(jīng)皮藥動學考察。
　　方法:
　　（1）進行處方前研究，包括藥物

3、的理化性質(zhì)考察，建立DSS、DPF、DST含量測定方法和脂質(zhì)體的包封率測定方法。
　?。?）采用乙醇注入法制備雙丹脂質(zhì)體（SD-Lips），分別以脂藥質(zhì)量比(X1)、卵磷脂與膽固醇質(zhì)量比(X2)、卵磷脂與十八胺質(zhì)量比(X3)、水化溫度(X4)為自變量，以丹參素包封率(Y1)、丹皮酚包封率(Y2)、丹參酮ⅡA包封率(Y3)為考察指標，采用Box-Behnken效應面法優(yōu)化制備工藝，制備SD-Lip Gels。
　?。?）考察S

4、D-Lip Gels的理化性質(zhì)及質(zhì)量，包括粒徑、Zeta電位、pH值、粘度、含量以及在高溫和強光條件下的穩(wěn)定性，進行體外透皮考察，模型擬合數(shù)據(jù)，比較SD-Lip Gels和普通凝膠劑（SD-Gels）中藥物的透皮速率、皮膚滯留量、凝膠層殘留量，并繪制體外滲透曲線。
　?。?）建立兔耳增生性瘢痕模型，建模21d后開始給藥，持續(xù)42d，采集瘢痕組織標本進行HE染色，進行組織學觀察，并測量瘢痕增生指數(shù)HI和成纖維細胞密度NA。采集兔血分

5、離血清，進行TGF-β1、IL-1β含量測定。
　　（5）利用微透析技術進行經(jīng)皮藥動學研究，用增量法和減量法進行探針體外回收率試驗，考察不同灌流速度、不同藥物濃度對探針回收率的影響，進行探針體內(nèi)回收率的校正和SD-Lip Gels和SD-Gels的經(jīng)皮藥動學研究，繪制皮下藥物濃度時間曲線，比較兩種劑型的藥動學參數(shù)。
　　結果:
　?。?）建立了HPLC含量測定方法和包封率測定方法。
　?。?）SD-Lips的最優(yōu)

6、制備工藝為X1=13.8，X2=4.6，X3=13.3，X4=50℃；DSS包封率為(30.62±2.17)％，DPF包封率為(51.16±2.54)%，DST包封率為(80.47±3.24)%，SD-Lips平均粒徑240.8nm，分散均勻，Zeta電位+16.2mV。
　?。?）SD-Lip Gels的pH值為6.48～6.62、粘度為23.9～24.8Pa·s，總藥物含量為2.12mg/g，遇高溫和強光不穩(wěn)定，需避光常溫或低

7、溫貯藏。SD-Lip Gels透皮速率與SD-Gels比較有所降低，凝膠層殘留量較低，皮膚滯留量明顯增加。
　?。?）與模型組相比，SD-Lip Gels組瘢痕的成纖維細胞細長呈梭形、細長、疏松有序排列，且成纖維細胞密度明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；治療后，兔血清TGF-β1、IL-1β含量與治療前比較均有顯著變化，與模型組及治療前比較，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　?。?）比較SD-Lip Gels與

8、SD-Gels的藥代動力學參數(shù)，兩種制劑的Tmax均接近1h，且SD-Gels的Cmax均高于SD-Lip Gels，SD-Lip Gels的半衰期t1/2、滯留期MRT、以及AUC面積比SD-Gels有所提升。SD-Lip Gels在藥物達到峰值后能長時間持續(xù)穩(wěn)定的釋放藥物，藥物滯留時間比SD-Gels長，藥物總透皮量顯著高于SD-Gels。
　　結論:
　　采用Box-Behnken效應面法優(yōu)化SD-Lip Gels制備