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1、中國農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文蠶豆類水孔蛋白基因的克隆、表達分析及其在氣孔運動中的作用姓名:崔香環(huán)申請學(xué)位級別:博士專業(yè):植物學(xué)指導(dǎo)教師:王學(xué)臣20041101AbstractStomatalporesintheepidermisofplantleavesareessentialforCabinflnxintotheleavesforphotosyntheticcarbonfixationStomatalclosureandopeningpl
2、ayanimportantroleinregulatingphotosynthesisandtranspiration,SO舶甜穢researchersareinterestedinthemechanismofstomatalmovement,whicharefocusedonsignaltransduction,osmoticsubstancesincytoplasm,ionchannelsandreceptorsinplasmame
3、mbrane,cytoskeletonandSOonHowevertherearefewstudiesOntheregulationofwatertransportinstomatalmovement。ThediscoveryofplantaquaporinsgivesanewideaforexploringtheregulationofwatertransmembranemovementinstomatalmovementAquapo
4、rinsmchannelproteinsforwatertransport。Alotofaquaporinshavebeenidentifiedinorganismsrangingfrombacteriatoanimalsandplants。Theplantaquapofinscould酶dividedintofourclasses:plasmamembraneintrinsicproteins(PIPs),tonoplastintri
5、nsicproteins(TIPs),NOD261ikemembraneintrinsicproteinsfNlps)andsmallandbasicintrinsicproteins(SiPs)。Howeve‘theirwaterchannelactivitysuhcellularlocationsandfunctionsinthesignaltransductionpathwayneedtobefuftherstudiedAltho
6、ughmanykindsofaquaporingeneshavebeenisolated,mostofresearchesarestillfocusedontheaquaporinsinrootsSomeevidencehaspreviouslyindicatedthataquapofingeneswereexpressedinFTciafabaguardcellsandinvolvedintheregulmionofstomatalm
7、ovement,HoweverwhichaquaporinsareexpressedinHcia知baguardcellsandfunctioninstomatalmovementareuncleartnthisstudyweisolatedanaquaporinlikegene;鬻pifromViciafabaleafepidermisandanalyzeditssequencetheexpressionandlocalization
8、ofthisgeneAtthesametime,anoverexpressionvectorforplantsWaSconstructedandtransformedintoArabidopsisInaddition,thefunctionandmechanismofP妒蹬lintransgenicArabidopsiswereprimarilystudiedTheresultsshowedasfotlowedTwooligonucle
9、otidedegenerateprimersweredesignedbasedonseveralconserve《regionsintheplantaquaporinaminoacidsequencesUsingRTPCRandRACEPCR,afulllengtheDNAofaquaporin—likegene々弦l1wasisolatedfromeDNApreparedfromViciafabaleafepidermisTheana
10、lysisofthesequenceshowsthat姆挎1eDNAis103%bpinlengthandcontainsanopenreadingframeof870一bpflankedby5。and3tnoncodingregionsof47andl22一bprespectively,Theproteincodingby290aminoacidsexhibitssixpredictedtransmembranehelices,MIP
11、tjamilysignaturesequenceSGxHxNPA旺thespecialplasmamembranesignaturesequenceGGGANXXXXGYandTGl珂NPARSk芥GAAlⅣI^,F(xiàn)黼。andacalculatedmolecularmassofabout307kDAscomparedtoPIPsidentifiedfromArabidopsis,VfPIPthasthehighestsequenceid
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