卵巢子宮內(nèi)膜異位癥IVF-ET結(jié)局及卵泡液炎性因子對其影響的研究.pdf

1、目的：
　　子宮內(nèi)膜異位癥(Endometriosis EM)影響著10％-15%的育齡婦女，且至少50%EM婦女合并不孕。EM患者有較差的輔助生殖技術(shù)臨床結(jié)局，具體明確的理論依據(jù)尚未明了。卵巢型子宮內(nèi)膜異位癥（Ovarian Endometriosis OEM）患者，因其病變主要異位于卵巢，而卵巢又是卵母細(xì)胞發(fā)育、成熟的場所，有可能對卵母細(xì)胞的成熟、受精影響較大，故對其具體情況進(jìn)行分析。卵母細(xì)胞的形態(tài)變化有可能與卵母細(xì)胞的成熟度

2、以及后期發(fā)育潛能有關(guān)，分析形態(tài)正常、透明帶厚、周隙大、顆粒粗、極體碎的卵母細(xì)胞的發(fā)生率變化及(In Vitro Fertilization-Embryo Transfer IVF-ET)的臨床結(jié)局變化情況,為通過卵母細(xì)胞形態(tài)預(yù)測臨床結(jié)局提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。子宮內(nèi)膜異位癥卵泡液微環(huán)境的變化對卵母細(xì)胞質(zhì)量及其周圍顆粒細(xì)胞的影響是近年輔助生殖技術(shù)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)，分析OEM患者卵泡液的中炎性因子 IL-6、TNF-α、IL-1變化對卵母細(xì)胞成熟、分化

3、、形態(tài)的影響及卵丘顆粒細(xì)胞的影響，為改善OEM臨床結(jié)局提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　收集2013年6月至2015年1月某試管嬰兒中心152例OEM資料為實(shí)驗(yàn)組，輸卵管因素不孕患者168例為對照組，回顧性分析。比較兩組的臨床基本數(shù)據(jù)包括年齡、不孕年限、基礎(chǔ)體重指數(shù)、竇卵泡數(shù)， FSH、LH、E2以及獲卵率、成熟卵（ metaphaseⅡ MⅡ）率、受精率、補(bǔ)救-卵胞漿內(nèi)單精子注射(Recovery-Intracytoplas

4、mic Sperm Injection R-ICSI)率、優(yōu)胚率、生化妊娠率、臨床妊娠率以及流產(chǎn)率。比較正常、顆粒粗、透明帶厚、周隙大、極體碎五種形態(tài)卵母細(xì)胞受精率、補(bǔ)救卵胞漿內(nèi)單精子注射(R-ICSI)率、卵裂率、優(yōu)胚率、生化妊娠率以及臨床妊娠率。ELISA法檢測取卵當(dāng)日卵泡液IL-6、TNF-α、IL-1表達(dá)變化。兩種不同的卵泡液對小鼠各階段未成熟卵母細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，分析比較各個時間點(diǎn)的成熟率。比較體外培養(yǎng)成熟與正常體內(nèi)成熟的小鼠卵母

5、細(xì)胞的受精率、異常形態(tài)率以及優(yōu)胚率。體外培養(yǎng)觀察卵丘顆粒細(xì)胞的生長情況， TUNEL法檢測顆粒細(xì)胞凋亡，化學(xué)發(fā)光法檢測單個卵泡 E2水平的變化，分析其與IL-6、TNF-α、IL-1水平、MⅡ卵率和臨床妊娠率的相關(guān)性。
　　結(jié)果：
　　1. OEM組和輸卵管因素組基本臨床數(shù)據(jù)無顯著性差異（P＞0.05）。OEM組的獲卵率、MⅡ卵率、受精率、優(yōu)胚率、生化妊娠率、臨床妊娠率顯著低于輸卵管因素組， R-ICSI率顯著高于輸卵管因素

6、組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）
　　2. OEM組正常形態(tài)卵較輸卵管因素組顯著減少，顆粒粗、周隙大、透明帶厚的卵較輸卵管因素組顯著增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。極體碎的卵增多不顯著，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。正常形態(tài)卵的優(yōu)胚率和生化妊娠率、臨床妊娠率較顆粒粗、周隙大、極體碎的卵增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。正常形態(tài)卵受精率較透明帶厚組顯著升高而R-ICSI率顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05

7、），臨床結(jié)局差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）
　　3. OEM組IL-6、TNF-α、IL-1表達(dá)均顯著高于輸卵管因素組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。GV、MⅠ、AM卵分別于培養(yǎng)24h、12h、6h成熟率達(dá)高峰，OEM組卵成熟率顯著低于輸卵管因素組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。體內(nèi)、體外成熟小鼠卵母細(xì)胞的受精率、異常形態(tài)率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但是體外成熟優(yōu)胚率較體內(nèi)成熟卵的優(yōu)胚率顯著下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.0

8、5）
　　4. OEM組卵丘顆粒細(xì)胞生長情況較差。OEM組卵丘顆粒細(xì)胞凋亡率較輸卵管因素組升高，單個卵泡的E2值降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）. IL-6、TNF-α、IL-1水平與卵丘顆粒細(xì)胞凋亡率正相關(guān)；卵丘顆粒細(xì)胞凋亡率與單個卵泡的E2水平負(fù)相關(guān)；單個卵泡的E2水平與MⅡ卵率正相關(guān)；MⅡ卵率與臨床妊娠率正相關(guān)（P＜0.001）
　　結(jié)論：
　　OEM的IVF臨床結(jié)局較差,異常形態(tài)卵母細(xì)胞增多，卵母細(xì)胞質(zhì)