卵巢子宮內(nèi)膜異位癥IVF-ET結局及卵泡液炎性因子對其影響的研究.pdf

1、目的：
　　子宮內(nèi)膜異位癥(Endometriosis EM)影響著10％-15%的育齡婦女，且至少50%EM婦女合并不孕。EM患者有較差的輔助生殖技術臨床結局，具體明確的理論依據(jù)尚未明了。卵巢型子宮內(nèi)膜異位癥（Ovarian Endometriosis OEM）患者，因其病變主要異位于卵巢，而卵巢又是卵母細胞發(fā)育、成熟的場所，有可能對卵母細胞的成熟、受精影響較大，故對其具體情況進行分析。卵母細胞的形態(tài)變化有可能與卵母細胞的成熟度

2、以及后期發(fā)育潛能有關，分析形態(tài)正常、透明帶厚、周隙大、顆粒粗、極體碎的卵母細胞的發(fā)生率變化及(In Vitro Fertilization-Embryo Transfer IVF-ET)的臨床結局變化情況,為通過卵母細胞形態(tài)預測臨床結局提供實驗依據(jù)。子宮內(nèi)膜異位癥卵泡液微環(huán)境的變化對卵母細胞質量及其周圍顆粒細胞的影響是近年輔助生殖技術領域研究的熱點，分析OEM患者卵泡液的中炎性因子 IL-6、TNF-α、IL-1變化對卵母細胞成熟、分化

3、、形態(tài)的影響及卵丘顆粒細胞的影響，為改善OEM臨床結局提供實驗依據(jù)。
　　方法：
　　收集2013年6月至2015年1月某試管嬰兒中心152例OEM資料為實驗組，輸卵管因素不孕患者168例為對照組，回顧性分析。比較兩組的臨床基本數(shù)據(jù)包括年齡、不孕年限、基礎體重指數(shù)、竇卵泡數(shù)， FSH、LH、E2以及獲卵率、成熟卵（ metaphaseⅡ MⅡ）率、受精率、補救-卵胞漿內(nèi)單精子注射(Recovery-Intracytoplas

4、mic Sperm Injection R-ICSI)率、優(yōu)胚率、生化妊娠率、臨床妊娠率以及流產(chǎn)率。比較正常、顆粒粗、透明帶厚、周隙大、極體碎五種形態(tài)卵母細胞受精率、補救卵胞漿內(nèi)單精子注射(R-ICSI)率、卵裂率、優(yōu)胚率、生化妊娠率以及臨床妊娠率。ELISA法檢測取卵當日卵泡液IL-6、TNF-α、IL-1表達變化。兩種不同的卵泡液對小鼠各階段未成熟卵母細胞進行培養(yǎng)，分析比較各個時間點的成熟率。比較體外培養(yǎng)成熟與正常體內(nèi)成熟的小鼠卵母

5、細胞的受精率、異常形態(tài)率以及優(yōu)胚率。體外培養(yǎng)觀察卵丘顆粒細胞的生長情況， TUNEL法檢測顆粒細胞凋亡，化學發(fā)光法檢測單個卵泡 E2水平的變化，分析其與IL-6、TNF-α、IL-1水平、MⅡ卵率和臨床妊娠率的相關性。
　　結果：
　　1. OEM組和輸卵管因素組基本臨床數(shù)據(jù)無顯著性差異（P＞0.05）。OEM組的獲卵率、MⅡ卵率、受精率、優(yōu)胚率、生化妊娠率、臨床妊娠率顯著低于輸卵管因素組， R-ICSI率顯著高于輸卵管因素

6、組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）
　　2. OEM組正常形態(tài)卵較輸卵管因素組顯著減少，顆粒粗、周隙大、透明帶厚的卵較輸卵管因素組顯著增多，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。極體碎的卵增多不顯著，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。正常形態(tài)卵的優(yōu)胚率和生化妊娠率、臨床妊娠率較顆粒粗、周隙大、極體碎的卵增高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。正常形態(tài)卵受精率較透明帶厚組顯著升高而R-ICSI率顯著降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05

7、），臨床結局差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）
　　3. OEM組IL-6、TNF-α、IL-1表達均顯著高于輸卵管因素組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。GV、MⅠ、AM卵分別于培養(yǎng)24h、12h、6h成熟率達高峰，OEM組卵成熟率顯著低于輸卵管因素組，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。體內(nèi)、體外成熟小鼠卵母細胞的受精率、異常形態(tài)率差異無統(tǒng)計學意義，但是體外成熟優(yōu)胚率較體內(nèi)成熟卵的優(yōu)胚率顯著下降，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.0

8、5）
　　4. OEM組卵丘顆粒細胞生長情況較差。OEM組卵丘顆粒細胞凋亡率較輸卵管因素組升高，單個卵泡的E2值降低，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）. IL-6、TNF-α、IL-1水平與卵丘顆粒細胞凋亡率正相關；卵丘顆粒細胞凋亡率與單個卵泡的E2水平負相關；單個卵泡的E2水平與MⅡ卵率正相關；MⅡ卵率與臨床妊娠率正相關（P＜0.001）
　　結論：
　　OEM的IVF臨床結局較差,異常形態(tài)卵母細胞增多，卵母細胞質