低強(qiáng)度脈沖超聲緩解化療后骨髓抑制的可行性研究.pdf

1、背景：
　　隨著社會(huì)的發(fā)展，環(huán)境的日益變化，腫瘤的發(fā)病率逐年上升，惡性腫瘤已經(jīng)成為危害人類健康的重大疾病。作為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)治療惡性腫瘤的一種重要手段——化學(xué)治療（化療），其在抑制腫瘤細(xì)胞生長的同時(shí)，對人體正常的組織細(xì)胞，特別是骨髓造血細(xì)胞的傷害也很明顯，易導(dǎo)致三系血細(xì)胞減少。骨髓抑制不僅延緩了化療的進(jìn)行進(jìn)而影響療效,還能引起貧血、感染和出血等并發(fā)癥。有時(shí)患者并不是死于腫瘤本身,而可能因?yàn)閲?yán)重的骨髓抑制引起的并發(fā)癥而致命。因此,及時(shí)發(fā)現(xiàn)

2、和緩解治療骨髓抑制是化療的重要環(huán)節(jié)。
　　目前，針對于化療后骨髓抑制的治療，主要集中于其相應(yīng)各系血細(xì)胞減少的對癥治療。然而現(xiàn)有的療法雖然可以不同程度的改善化療所致骨髓抑制，但都有一定的局限性，如集落刺激因子引起發(fā)熱骨痛，紅細(xì)胞輸注引起動(dòng)靜脈栓塞等。因此，還不能完全滿足適應(yīng)臨床治療需要，需要探索新的治療方法。
　　近年來，低強(qiáng)度脈沖超聲（Low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS）作為一種安全的

3、物理治療方法，逐漸應(yīng)用到臨床的治療上，如促進(jìn)骨與軟組織創(chuàng)傷的愈合等。隨著對LIPUS諸多研究的展開，其在細(xì)胞生物學(xué)方面的作用越來越受到重視。近年來國內(nèi)外研究證實(shí)了LIPUS具有促進(jìn)人成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞等細(xì)胞的增殖和細(xì)胞外基質(zhì)分泌作用。課題組前期采用LIPUS作用于活體兔骨髓，觀察輻照前、后骨髓來源有核細(xì)胞數(shù)目及增生程度的變化情況，證實(shí)了LIPUS對活體兔骨髓有核細(xì)胞增殖效應(yīng)具有明顯的促進(jìn)作用，對新西蘭大白兔化療后白細(xì)

4、胞減少癥及血小板減少癥均有積極的療效。而白細(xì)胞減少及血小板減少均為化療后骨髓抑制的外在表現(xiàn)。因此，本課題采用環(huán)磷酰胺處理新西蘭大白兔建立化療后骨髓抑制模型，采用LIPUS輻照作為干預(yù)手段，探討LIPUS緩解化療后骨髓抑制的可行性。
　　目的：
　　1.建立新西蘭大白兔化療后輕度及重度骨髓抑制模型。
　　2.研究LIPUS對化療后骨髓抑制動(dòng)物模型一般狀況的影響。3.研究LIPUS輻照骨髓后血液系統(tǒng)的相關(guān)改變。
　　

5、方法：
　　1.40只新西蘭大白兔經(jīng)耳緣靜脈注射環(huán)磷酰胺，劑量為15mg/kg，另40只同樣方法注射環(huán)磷酰胺，劑量為40mg/kg。給藥前后耳中動(dòng)脈取血，進(jìn)行血常規(guī)檢測。
　　2.將骨髓抑制模型兔隨機(jī)分為2組，分別為對照組和LIPUS治療組。LIPUS組對模型兔的右側(cè)股骨干骺端進(jìn)行輻照，輻照參數(shù)為強(qiáng)度
　　0.2W/cm2,頻率0.6MHz，時(shí)間20min。連續(xù)輻照7天后，將治療組隨機(jī)分為兩組，一組為短期治療組，停止輻

6、照，一組為長期治療組，繼續(xù)輻照至28天。對照組采取假輻照，過程與治療組相同，但不給與超聲能量刺激。輻照期間定時(shí)進(jìn)行血常規(guī)檢測。
　　3.ELISA法檢測造血相關(guān)因子，流式細(xì)胞術(shù)檢測粒細(xì)胞吞噬功能。
　　結(jié)果：
　　1.環(huán)磷酰胺造模后，白細(xì)胞數(shù)量明顯下降，與給藥前相比具有顯著性差異（P<0.05）；骨髓涂片顯示骨髓有核細(xì)胞數(shù)量明顯減少，流式細(xì)胞儀檢測顯示粒細(xì)胞吞噬功能下降，ELISA檢測顯示IL-3上升（P<0.05），

7、EPO,GM-CSF下降（P<0.05）。
　　2.LIPUS治療后，模型兔外周血白細(xì)胞數(shù)量立刻升高，在3-5天時(shí)出現(xiàn)第一個(gè)高峰后出現(xiàn)回落，隨著治療時(shí)間的增加，WBC數(shù)量在后期持續(xù)升高恢復(fù)至正常值，對照組則持續(xù)處于低值，兩組間數(shù)據(jù)相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。HGB在開始輻照后輕微上升，一直處于正常值范圍內(nèi)，且與對照組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。開始輻照10天以后，長期治療組內(nèi)HGB略高于短期治療組，但兩組數(shù)據(jù)間

8、無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05），對照組在造模后HGB持續(xù)下降。
　　3.LIPUS治療后，模型兔死亡率相比對照組顯著降低。骨髓涂片顯示骨髓有核細(xì)胞增生活躍。
　　4.LIPUS治療后，ELISA檢測IL-3，EPO,GM-CSF，與對照組相比均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）,流式細(xì)胞儀檢測粒細(xì)胞吞噬功能，與正常兔相比，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）
　　結(jié)論：
　　LIPUS輻照治療化療后骨髓抑制模型兔，能有效緩解其骨