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文檔簡介
1、背景:
燒傷創(chuàng)面恢復后往往伴有色素過度或色素缺失,影響美觀或抗紫外線能力。眾所周知,黑素小體由黑素細胞合成并轉(zhuǎn)移至角質(zhì)形成細胞,在KC中重新分布,呈現(xiàn)皮膚顏色。黑素小體在皮膚色素性疾病中有著舉足輕重的生物學意義。
在人體皮膚組織中,MC可以分泌黑素小體,目前黑素細胞分泌黑素小體的方式及機制尚不清楚,但可以肯定的是黑素小體的分泌必定會引起黑素細胞表面形態(tài)的變化,因而我們通過對細胞表面的形態(tài)進行觀察研究,采用對形態(tài)觀察效
2、果較好的原子力顯微鏡(AFM)及掃面電鏡(SEM)進行觀察拍攝,試圖運用直觀方法驗證MC中黑素小體的傳遞過程。
目的:
黑素小體的傳遞過程總會引起細胞表面形態(tài)的變化,原子力顯微鏡(AFM)及環(huán)境掃描電鏡(ESEM)可以觀察到納米水平的物質(zhì)表面形態(tài),為了探究色素沉著機制。因此,我們通過AFM及ESEM對分泌黑素小體前后表面變化情況進行觀察,采集黑素細胞分泌黑素小體后形態(tài)變化的直觀圖像證據(jù)。發(fā)現(xiàn)黑素細胞表面存在大量坑狀結(jié)
3、構(gòu)。證明此坑狀結(jié)構(gòu)為黑素小體胞吐后留下的有力證據(jù)。
方法:
從包皮組織中提純并培養(yǎng)MC及KC,對提純的MC分4組進行培養(yǎng),分別為空白對照組,α-MSH刺激組,PGE2刺激組,及與KC共培養(yǎng)組,4組均在培養(yǎng)的第3天給予戊二醛固定,分別按照相應的AFM及ESEM標本制作步驟進行標本制作,然后分別在AFM及ESEM下采集細胞表面形態(tài)的圖像,對統(tǒng)計數(shù)據(jù)進行收集及整理,并運用統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)行單因素方差分析、LSD-t檢驗進行數(shù)
4、據(jù)分析。
結(jié)果:
AFM及ESEM圖像均觀察到MC表面呈現(xiàn)大小較均勻的坑狀凹陷,樹突尾端較胞體表面的坑狀結(jié)構(gòu)明顯增多(P<0.05)。α-MSH刺激組、PGE2刺激組及與KC共培養(yǎng)組中黑素細胞表面的坑狀結(jié)構(gòu)較空白對照組明顯增多(P<0.05)。
結(jié)論:
通過各種刺激因子的作用,MC表面坑狀凹陷均相應的增多。證明黑素細胞表面的坑狀結(jié)構(gòu)與黑素小體分泌作用密切相關,為證明黑素小體通過胞吐作用進行分泌和傳
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