熱處理對UVB輻射后人表皮黑素細(xì)胞活性影響的研究.pdf

1、目的：
　　白癜風(fēng)是一種常見的以局部或全身皮膚黏膜色素脫失為特征的皮膚病。人群患病率約為0.1～2％,多于幼年起病，無明顯種族及性別差異。皮損可發(fā)生于任何部位，皮膚病理顯示皮損處表皮黑素細(xì)胞明顯減少或消失。該病病因不明，目前認(rèn)為可能與遺傳、自身免疫異常、氧化應(yīng)激、神經(jīng)精神等因素有關(guān)。白癜風(fēng)臨床治療較為棘手，主要包括藥物治療、光療、手術(shù)治療等。光療，特別是波長為311～313nm的中波紫外線，由于療效確切、安全可靠，現(xiàn)已成為白癜風(fēng)臨

2、床治療的首選方法之一。
　　近年來，人們逐漸發(fā)現(xiàn)熱處理(42℃,1h）與紫外線相似，能夠增加黑素細(xì)胞的酪氨酸酶活性及黑素合成，促使黑素細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞共培養(yǎng)體系中酪氨酸酶相關(guān)蛋白-1陽性的黑素細(xì)胞明顯增多；同時，以熱效應(yīng)為主的紅外線可明顯減少大劑量UVB輻射誘導(dǎo)的角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡。以上結(jié)果提示我們熱與UVB的聯(lián)合治療可能將成為白癜風(fēng)治療的重要手段。本實驗研究熱處理對UVB輻射后人表皮黑素細(xì)胞的增殖活性、酪氨酸酶活性、黑素合成及細(xì)

3、胞周期的影響，并初步探討其機制，為今后熱療與UVB聯(lián)合應(yīng)用治療白癜風(fēng)等色素脫失性皮膚病提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　1.以體外培養(yǎng)的正常人黑素細(xì)胞作為研究對象，分別以20、30、50、70、90、120、180mJ/cm2 NB-UVB輻射，采用四甲基偶氮唑藍(lán)比色法（MTT）檢測細(xì)胞存活率，并選擇最佳照射劑量進行后續(xù)實驗。
　　2.以42℃,1h為熱處理劑量，將黑素細(xì)胞分為四組：正常對照組、UVB組、加熱組、UVB+

4、熱組，分別給予不同干預(yù)，連續(xù)3d，末次干預(yù)24h后以MTT法檢測細(xì)胞增殖活性，左旋多巴(L-Dopa)為底物測定酪氨酸酶活性，NAOH法測定黑素含量，流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期變化。
　　結(jié)果：
　　1.分別以20、30、50、70、90、120、180mJ/cm2 UVB連續(xù)照射黑素細(xì)胞3d后，細(xì)胞存活率隨著劑量的增加而降低，選擇50mJ/cm2作為最佳照射劑量。
　　2.黑素細(xì)胞經(jīng)不同干預(yù)后比較細(xì)胞增殖活性，UVB組較

5、對照組減少7.1％（P>0.05），加熱組、UVB+熱組細(xì)胞較對照組分別增加25.3％和58.1％（P<0.05）。熱處理與UVB共同干預(yù)具有協(xié)同作用。
　　3.黑素細(xì)胞經(jīng)不同干預(yù)后，UVB組、加熱組、UVB+熱組細(xì)胞的酪氨酸酶活性較對照組分別增長3.8％、11.5％和31.9％（P<0.05），三組細(xì)胞的黑素含量較對照組分別增加17.5％、31.6％和67.3％（P<0.05）。熱處理與UVB輻射聯(lián)合干預(yù)具有協(xié)同作用。
　

6、　4.黑素細(xì)胞給予不同干預(yù)后，UVB組、加熱組、UVB+熱組處于G1期的細(xì)胞較對照組分別下降24.61％、13.16％和32.02％（P<0.05）；處于S期的細(xì)胞較對照組分別增加15.02％、8.58％和17.14％（P<0.05），處于G2期的細(xì)胞分別增加12.93％、7.52％、23.60％（P<0.05）。熱處理與UVB輻射聯(lián)合干預(yù)具有協(xié)同作用。
　　結(jié)論：
　　1.熱處理（42℃,1h）能有效促進黑素細(xì)胞增殖，與U