微切助互作技術提取王棗子活性成分及藥理作用研究.pdf

1、中草藥王棗子自然資源較為豐厚，王棗子全草均可作為藥用，具有抑菌消炎，清熱解毒等多種作用。王棗子中成分復雜，自受關注以來對其開發(fā)研究進程緩慢，其化學成分和藥理作用研究較為局限。目前文獻研究均采用傳統(tǒng)加熱回流的提取方法提取王棗子中化學成分，此方法不僅提取率低，資源的利用率降低，而且高溫加熱能夠破壞不穩(wěn)定活性成分結構，使得成分的活性降低。本研究通過微切助互作技術結合超聲提取技術提取王棗子根中生物活性成分，提出安全高效，綠色環(huán)保的天然產(chǎn)物提取技

2、術，并探究王棗子化學成分的抗癌活性及其初步作用機制。
　　本研究用微切助互作技術提取王棗子乙素，首先采用單因素實驗考察乙醇濃度，提取溫度，提取時間和提取次數(shù)對王棗子乙素得率的影響；進一步利用正交優(yōu)化實驗選取最優(yōu)提取條件。正交實驗優(yōu)化得出最佳條件：在80%的乙醇，55℃條件下，連續(xù)提取4次，每次提取30 min，得到王棗子乙素得率最大。按照控制變量的方法進行實驗，篩選出最佳助劑種類和使用量，分別選擇Na2CO3，NaHCO3和β-環(huán)

3、糊精作為提取助劑與王棗子根共同研磨，助劑篩選實驗得到Na2CO3做助劑時，王棗子乙素得率最高。助劑用量優(yōu)化實驗結果表明，Na2CO3助劑用量3.0%(w/w)時達到最佳提取效果，平均最大得率為4.99%，比浸泡提取得率提高了1.39%，提取時間由24 h縮短到1.5 h。本研究采用硅膠柱層析，薄層層析，重結晶等多種方法分離純化提取物中的化學成分，確定化合物王棗子乙素和內(nèi)折香茶菜苷A，首次從王棗子中分離得到內(nèi)折香茶菜苷A。通過MTT法，乳

4、酸脫氫酶細胞毒檢測和活性氧檢測實驗研究王棗子根中化學成分的抗癌活性。浸泡，超聲，微切助法得到的三種提取物（20μg/mL）分別作用HepG2細胞24h后，微切助法提取得到提取物生物活性最好；分離出的王棗子乙素和內(nèi)折香茶菜苷A對HepG2具有較強的抑制作用，對HepG2細胞IC50值分別為7.09±0.21μmol/L和5.04±0.32μmol/L。微切助互作技術結合超聲波技術提取成功應用于王棗子根活性成分的提取，顯著降低了提取時間，提