異丙基腎上腺素通過鈣調蛋白依賴性激酶Ⅱ介導增加大鼠心肌細胞鈣滲漏.pdf

1、目的：探討大鼠離體心室肌細胞舒張期鈣滲漏與鈣調蛋白依賴性激酶Ⅱ(CaMKⅡ)、蛋白激酶A(PKA)之間的關系。
　　 方法：1.采用“四步”酶消化法分離SD大鼠心室肌細胞，即無鈣臺氏液灌流、60μ mol/L低鈣酶液灌流、180μ mol/L低鈣臺氏液灌流和室溫下KB液中孵育。2.實驗分為對照組、異丙腎上腺素(isoprenaline，ISO)組、CGP組、H-89組、KN-93組共5組。ISO灌流Fura-2/AM熒光標記好的

2、心室肌細胞，模擬慢性心力衰竭時的β-腎上腺素受體過度激活狀態(tài)。3.利用鈣成像技術先后測定不同組藥物干預后心室肌細胞內鈣熒光強度比值Ratio值(R1)，加入丁卡因阻斷肌漿網鈣釋放通道的R2值，以及加入咖啡因后觸發(fā)肌漿網中儲存鈣釋放的R3值。(R1-R2)代表心肌細胞舒張期鈣滲漏，(R3-R1)即代表肌漿網鈣容量，兩者的比值反映了鈣滲漏程度。
　　 結果：1.五組間加咖啡因后胞漿內鈣熒光強度上升幅度即肌漿網鈣容量差別無統(tǒng)計學意義。

3、2.與對照組相比，ISO組心肌細胞加丁卡因后胞漿內鈣熒光強度下降幅度(△Fratio：0.014±0.0025 vs.0.004±0.0011，P<0.01)、鈣滲漏程度(％：44.3±5.32 vs.20.3±7.33，P<0.05)明顯增加；CGP組與ISO組相比，心肌細胞加丁卡因后胞漿內鈣熒光強度下降幅度(△Fratio：0.007±0.0019 vs.0.014±0.0025，P<0.01)、鈣滲漏程度(％：23.6±7.49

4、vs.44.3±5.32，P<0.05)明顯減少；CGP組與對照組相比，上述指標差別無統(tǒng)計學意義。3.H-89組和對照組相比，加丁卡因后胞漿內鈣熒光強度下降幅度(△Fratio：0.014±0.0031 vs.0.004±0.0011，P<0.01)、鈣滲漏程度(％：47.9±6.78vs.20.3±7.33，P<0.05)明顯增加；H-89組與ISO組相比，上述指標差別無統(tǒng)計學意義。4.KN-93組與ISO組相比，心肌細胞加丁卡因后胞