小鼠主要嗅覺表皮組織內AC3缺失對相關因子及信號通路的影響.pdf

1、主要嗅覺表皮（MOE）組織能夠感受和傳導哺乳動物的嗅覺信號，是嗅覺信號轉導的重要化學感受器官。在MOE組織中，至少有三個信號通路介導嗅覺信號的轉導：環(huán)腺苷酸（cAMP）信號通路，肌醇1,4,5-三磷酸（IP3）信號通路和Hedgehog(Hh)信號通路，其中cAMP信號通路是嗅覺傳導的主要通路，腺苷酸環(huán)化酶Ⅲ（AC3）為該信號通路的重要成員之一。AC3的缺失引起cAMP信號通路受損，出現(xiàn)嗅覺喪失，伴隨著雄性攻擊能力、母性關愛能力、學習與

2、記憶能力及生殖能力下降。研究發(fā)現(xiàn)，MOE組織中存在腺苷酸環(huán)化酶Ⅱ（AC2），AC3，腺苷酸環(huán)化酶Ⅳ（AC4）的表達，但是，AC3缺失的情況下同工酶AC2與AC4是否在嗅覺信號的轉導中發(fā)揮補償作用？MOE組織中的AC3是一種高度的N-糖基化蛋白，β1,3-N-乙酰氨基葡萄糖基轉移酶Ⅱ（β3GnT2）的表達影響AC3的活性及其在神經(jīng)軸突中的定位，那么，AC3的缺失是否引起β3GnT2表達量的改變？此外，MOE組織中存在部分嗅覺神經(jīng)元使用IP

3、3信號通路傳導嗅覺信號，Hh信號通路可影響嗅覺神經(jīng)元的生長和分支等，AC3的缺失是否引起IP3，Hh信號通路的改變，從而影響cAMP信號通路的信號傳導？這些問題目前為止仍是未知的。為了解釋上述問題，本實驗選擇AC3缺失（AC3-/-）小鼠及其同窩出生的野生型（AC3+/+）小鼠的MOE組織，采用實時熒光定量PCR（qRT-PCR）及免疫熒光組織化學技術進行研究。
　　本研究主要內容包括：⑴AC3-/-小鼠MOE組織中的三個AC3相

4、關因子ac2，ac4，β3gnt2基因水平下調，且對應蛋白表達量下調，AC2，AC4，以及β3GnT2的表達部位均沒有發(fā)生改變。⑵AC3-/-小鼠MOE組織中IP3信號通路的主要基因ltrp1，calm1，calm2下調，該信號通路的代表蛋白CaM，IP3KA蛋白表達量下調，表達部位沒有發(fā)生改變。⑶AC3-/-小鼠MOE組織中Hh信號通路的主要基因ptch，smo，gli1，gli2基因下調，代表蛋白PTCH，SMO蛋白免疫熒光染色結果