小鼠腺苷酸環(huán)化酶Ⅲ缺失對(duì)部分嗅覺受體和相關(guān)分子表達(dá)的影響.pdf

1、主要嗅表皮（MOE）結(jié)構(gòu)完整性是嗅覺感知的基礎(chǔ)，而氣味誘導(dǎo)的嗅覺神經(jīng)元（ORNs）活動(dòng)是嗅覺系統(tǒng)形成和維持的關(guān)鍵因素。嗅覺受體（ORs）是神經(jīng)元活動(dòng)的起點(diǎn)，負(fù)責(zé)結(jié)合氣味分子并向下游傳遞信號(hào)。腺苷酸環(huán)化酶Ⅲ（AC3）是催化生成第二信使cAMP的最主要的酶，在嗅覺通路中位于ORs的下游。AC3敲除小鼠嗅覺能力及嗅覺相關(guān)行為喪失，大量嗅覺相關(guān)基因表達(dá)異常。在小鼠生后的發(fā)育過程中，AC3缺失具體如何影響ORs及相關(guān)分子的表達(dá)，尚待研究。為了探討

2、AC3缺失與小鼠生后MOE發(fā)育缺陷的關(guān)系，本文采用HE技術(shù)對(duì)出生后不同年齡AC3-/-型和AC3+/+小鼠的MOE組織進(jìn)行染色，觀察AC3缺失對(duì)MOE形態(tài)發(fā)育的影響；采用熒光原位雜交（FISH）技術(shù)對(duì)AC3-/-和野生型小鼠 MOE進(jìn)行 OMP、OR基因的雜交，以明確AC3缺失對(duì)ORNs發(fā)育成熟和ORs表達(dá)的影響；并對(duì)MOE發(fā)育及ORs表達(dá)相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子Lhx2和Emx2、轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白R(shí)TP、輔助蛋白R(shí)EEP1以及偶聯(lián)G蛋白輔助因子Ric-

3、8b進(jìn)行差異表達(dá)分析。發(fā)現(xiàn)AC3缺失對(duì)MOE組織出生后發(fā)育和OR表達(dá)的重要影響。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴AC3缺失導(dǎo)致小鼠出生后至成年的發(fā)育過程中 MOE厚度逐漸變薄，成熟 ORNs數(shù)量逐漸減少，至小鼠成年時(shí)MOE嚴(yán)重受損。⑵對(duì)AC3-/-小鼠MOE中ORs基因的表達(dá)進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)ORs在MOE發(fā)育過程中，OR+-ORNs數(shù)量極顯著下調(diào)，單個(gè)ORNs亮度也明顯減弱，且下調(diào)隨年齡增加漸趨嚴(yán)重，而表達(dá)區(qū)域未發(fā)生改變。⑶對(duì)MOE中R