一個新的血影蛋白超家族成員（8B7）的結(jié)構(gòu)與功能分析.pdf

1、8B7cDNA(GenBank登記號AF043290)是本實驗室克隆的。其編碼蛋白質(zhì)分子中有血影蛋白重復(fù)序列，因此是血影蛋白蛋白超家族的一個新成員。我們稱此蛋白質(zhì)為8B7血影蛋白。生物信息學(xué)分析顯示，此cDNA的核苷酸序列與定位于核膜的血影蛋白超家族成員Enaptin、Nesprin-1、Myne-1、Syne-1等的cDNA的3'端1835bp核苷酸序列100％同源。它們均位于人第6號染色體長臂2區(qū)5帶，是同一個基因通過mRNA變位剪

2、接產(chǎn)生的。Enaptin、Nesprin-1、Myne-1及Syne-1蛋白質(zhì)的分子中有多個核定位信號序列(NLS)，而8B7血影蛋白分子中則缺失了這些核定位信號序列。這樣，就產(chǎn)生8B7血影蛋白的亞細胞定位問題。我首先作了8B7血影蛋白在COS-7細胞中的亞細胞定位，觀察到它在核膜也有定位。我對8B7血影蛋白分子的氨基酸序列作了進一步分析，見其C-端的跨膜螺旋結(jié)構(gòu)附近有與果蠅的Klarsicht蛋白高度同源的一段氨基酸序列。這段保守的蛋

3、白序列被稱為Klarsicht樣結(jié)構(gòu)域/KLS結(jié)構(gòu)域/KASH結(jié)構(gòu)域。它與核膜定位也相關(guān)。為證明是這個結(jié)構(gòu)域決定了8B7血影蛋白在核膜的定位，我構(gòu)建了插入有全長8B7cDNA、切除了Klarsicht樣結(jié)構(gòu)域的8B7cDNA、或切除了3'端核苷酸序列但保留了Klarsicht樣結(jié)構(gòu)域的8B7cDNA的重組定位載體，轉(zhuǎn)入COS-7細胞后觀察到切除了Klarsicht樣結(jié)構(gòu)域后，cDNA編碼的蛋白質(zhì)在核膜上無表達，而保留Klarsicht樣