磨盤草乙酸乙酯部位指紋圖譜的建立及其對肝硬化腹水大鼠的干預作用和利尿活性成分的研究.pdf

1、目的：
　　1.建立磨盤草乙酸乙酯部位指紋圖譜，為其譜效關系提供依據(jù)；
　　2.研究磨盤草乙酸乙酯部位利尿作用，并通過灌胃給藥觀察磨盤草乙酸乙酯部位對肝硬化腹水大鼠的干預作用；
　　3.通過研究磨盤草乙酸乙酯部位血中移行成分，確定利尿作用的活性成分。
　　方法：
　　1.指紋圖譜研究：采用高效液相色譜法，色譜柱為Agilent TC-C18（5μm，4.6 mm×250 mm）；流動相為甲醇-0.1％磷酸線

2、性梯度洗脫，流速為0.8mL/min；檢測波長為226 nm；柱溫為25℃。
　　2.利尿作用研究：選用SPF級SD大鼠隨機分為正常對照組、氫氯噻嗪對照組、磨盤草乙酸乙酯部位高、中、低劑量組。分組后連續(xù)灌胃5天，末次給藥后，收集24 h尿液，測定其尿量；磨盤草乙酸乙酯部位對肝硬化腹水大鼠干預作用的研究：選用SPF級SD雄性大鼠100只，適應性飼養(yǎng)1周后，隨機取10只作為空白對照組，除空白組大鼠外，其余動物給予35%苯巴比妥溶液作為

3、飲用水，1周后恢復正常飲水，并給予40%CC14-植物油背部皮下注射造模。第2周始每周皮下注射40%CC14-植物油溶液3次，每次劑量為0.2mL/100g，首劑加倍。從第十四周起，每周周末從造模動物中隨機處死2只大鼠，將大鼠肝臟制成切片，做HE染色，直到觀察大鼠肝臟肝硬化的形成；同時再隨機抓取2只抽腹水，如有腹水抽出，即確定肝硬化腹水模型復制成功。于末次給藥后，進行腹腔積液的測定，采血用于測定AST、ALT、ALB肝功能指標、血清K+

4、濃度、血漿Ald水平等的測定。
　　3.利尿活性成分的研究：選用SPF級SD雄性大鼠，經(jīng)灌胃給藥，劑量為120mg/kg，1d/次，連續(xù)灌胃五天，于第四天灌胃給藥后收集24h的尿液，于第五天灌胃給藥60min后腹主動脈取血。應用高效液相色譜法和液質(zhì)聯(lián)用技術建立經(jīng)大鼠口服磨盤草乙酸乙酯部位后含藥血清樣品中成分的分析方法，通過對比空白血清、含藥血清成分異同以及空白尿液、含藥尿液成分異同，確定大鼠口服磨盤草乙酸乙酯部位后的血中移行成分。

5、
　　結果：
　　1.建立了磨盤草乙酸乙酯部位指紋圖譜共有模式，并標定了10個共有峰，10批樣品與對照指紋圖譜相似度均在0.85以上。
　　2.磨盤草乙酸乙酯部位高、中劑量組的尿量比空白組增多（P<0.01）。
　　3.肝硬化腹水造模組的肝臟肉眼見大鼠肝臟明顯腫大，表面凹凸不平，可見大小結節(jié)，肝臟組織病理學檢查顯示假小葉的形成。
　　4.與空白組比較，模型組腹水量明顯增多（P<0.01）；與模型組比，磨盤草

6、乙酸乙酯部位高、中劑量腹水量減少（P<0.01）。
　　5.與空白組相比，模型組血清中的ALT、AST含量顯著增高（P<0.01）；與模型組相比，磨盤草乙酸乙酯部位高劑量ALT和AST均降低（P<0.05）。
　　6.與空白對照組比，陽性組血清K+含量降低（P<0.05）；各磨盤草給藥組血清K+含量與空白組比無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。
　　7.與空白組比，高劑量組、陽性組血漿中Ald降低（P<0.05）；其他組與空

7、白組比較均無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。
　　8.十個產(chǎn)地中的血清入血移行成分差異小，其入血成分初步判定來源于磨盤草乙酸乙酯部位或是其次級代謝產(chǎn)物。
　　結論：
　　1.所建的指紋圖譜方法簡單，準確可靠，重復性好，可為后續(xù)譜效關系研究提供一定的依據(jù)。
　　2.磨盤草乙酸乙酯部位具有利尿作用。
　　3.磨盤草乙酸乙酯部位各組大鼠腹腔積液量明顯減少，該藥具有消腹水作用。
　　4.磨盤草乙酸乙酯部位能降低A