EGCG全?；苌矬w外降解及對環(huán)磷酰胺引起的肝毒性的保護作用.pdf

1、表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）是一種主要存在于茶葉中的多酚類化合物，具有抗氧化、清除自由基、抗炎、抗菌、抗光學損傷、抗腫瘤、抗HIV、調節(jié)代謝綜合癥、預防心血管疾病、預防神經(jīng)退行性病變等多種生理活性。但是由于其脂溶性及穩(wěn)定性差，生物利用度低等缺點，使其使用受到限制。近年來，國內外開展了EGCG改性的相關研究，以期改善EGCG的應用特性。
　　本研究制備了一系列EGCG酰化衍生物（全乙?；疎GCG、全丙?；疎GCG、全丁?；疎

2、GCG、全己?；疎GCG、全辛?；疎GCG、全癸?；疎GCG和全苯甲酰化EGCG），主要對全乙酰化EGCG、全丙?；疎GCG和全丁?；疎GCG在人工模擬胃腸液中的穩(wěn)定性、在小鼠肝微粒體中的降解及它們對環(huán)磷酰胺引起的肝損傷的保護作用做了研究，具體內容如下：
　?。?）全?；疎GCG衍生物制備本研究以酸酐或酰氯為?；噭?，以N，N-二甲氨基吡啶（DMAP）或吡啶為催化劑，TLC監(jiān)測反應程度。反應完全后，依次用蒸餾水、飽和NaHCO3溶

3、液、蒸餾水洗滌，所得有機層用無水MgSO4干燥，旋蒸除去溶劑。所得粗產物采用硅膠柱層析法進行分離，得到一系列高純度的全?；漠a物。合成的產物通過MS、1H NMR、13C NMR等手段確認為相應的衍生物。
　?。?）EGCG酰化衍生物的穩(wěn)定性及降解特性本研究對EGCG及全乙?；?、全丙酰化、全丁?；腅GCG在人工模擬胃腸液中的穩(wěn)定性進行了對比，和這三種?；苌镌谛∈蟾挝⒘ｓw中的降解特性做了研究。采用HPLC法測定這三種衍生物在模

4、擬胃腸液和微粒體體外代謝系統(tǒng)中的含量，比較EGCG及其三種衍生物在模擬胃腸液的穩(wěn)定性，利用底物消除法計算這三種衍生物的酶促動力學參數(shù)Km和Vmax。結果表明，在人工模擬胃液中，EGCG及其衍生物均能保持一定的穩(wěn)定性；在人工模擬腸液中，EGCG迅速發(fā)生變化，在本實驗條件下幾乎檢測不到。三種衍生物的穩(wěn)定性相比于EGCG明顯提高，穩(wěn)定性由強到弱依次為BuEGCG>PrEGCG>AcEGCG。EGCG三種全?；苌镌谛∈蟾挝⒘ｓw中的降解實驗表

5、明，AcEGCG的Km=0.2098mmol·L-1、Vmax=4.7484μmol·min-1·mg-1；PrEGCG的Km=0.2155mmol·L-1、Vmax=3.3546μmol·min-1·mg-1；BuEGCG的Km=0.3303mmol·L-1、Vmax=0.5063μmol·min-1·mg-1。隨著?；兼湹难娱L，降解速度逐漸減慢，肝內清除率逐漸降低。
　?。?）對環(huán)磷酰胺引起的肝毒性的保護作用本研究采用環(huán)磷酰

6、胺對昆明小鼠造模，引起肝臟損傷，觀察EGCG及其全乙?；⑷；?、全丁?；难苌飳Νh(huán)磷酰胺引起的肝毒性的保護作用。實驗設置對照組、環(huán)磷酰胺組、EGCG及其衍生物(AcEGCG、PrEGCG、BuEGCG)低、高劑量組，第1-9天灌胃給予藥物，第10天（除對照組外）腹腔注射環(huán)磷酰胺。采用全自動生化分析儀測定小鼠血清生化酶（AST、ALT、LDH）指標，采用試劑盒測定肝臟組織勻漿中的MDA、GSH量和SOD、CAT、GSH-PX活性，并

7、觀察肝臟組織病理學變化。結果表明，與環(huán)磷酰胺組比較，EGCG的高劑量、三種衍生物的低、高劑量組小鼠血清中AST、ALT、LDH活性明顯下降，組織中SOD、CAT、GSH-PX活性升高，MDA含量下降，GSH含量升高。環(huán)磷酰胺組小鼠肝臟出現(xiàn)變性壞死、凋亡及炎性細胞浸潤等病理變化，而EGCG及其三種衍生物的低、高劑量組大鼠肝臟病理變化不同程度減輕。EGCG及其衍生物對環(huán)磷酰胺致小鼠肝臟毒性具有一定保護作用。
　　結論：EGCG經(jīng)?；?/p>