幾種綠僵菌的核相及脈沖電泳（PFGE）核型方法研究.pdf

1、本研究采用細(xì)胞核熒光染色技術(shù)、原生質(zhì)體細(xì)胞脫壁技術(shù)和脈沖電泳技術(shù)首次比較系統(tǒng)的對(duì)5種綠僵菌(Metarhizium.spp)各生長(zhǎng)階段的核相進(jìn)行系統(tǒng)觀察分析，并進(jìn)行了脈沖電泳核型分析中完整染色體DNA制備方法和電泳方法的研究?！　『藷晒馊旧l(fā)現(xiàn)，011108菌株和兩種來自于蟲草無性型的戴氏綠僵菌、金龜子綠僵菌大孢變種的分生孢子多為單核，少有雙核，各生長(zhǎng)階段沒有明顯的核數(shù)變化；金龜子綠僵菌小孢變種的分生孢子幾乎全為雙核；雙型孢綠僵菌培養(yǎng)

2、性狀及細(xì)胞核數(shù)發(fā)生了一定變化，出發(fā)菌株的大、小孢子幾乎都具有細(xì)胞核，大孢子的核數(shù)為2～4個(gè)，轉(zhuǎn)接20多代后的菌株，大孢子多為單核，小孢子很少具有細(xì)胞核?！　”狙芯孔C明了原生質(zhì)體法是制備綠僵菌完整染色體DNA樣品最可靠的方法，并建立了適合脈沖電泳核型分析的供試綠僵菌原生質(zhì)體制備體系，解決了供試菌株完整染色體DNA樣品制備的問題。即以15～20mg/ml的溶壁酶為細(xì)胞壁破壁酶，0.7mol/LNaCl，pH5.8為滲壓穩(wěn)定劑，30℃處理1