毛花獼猴桃氯仿層單體化合物分離及其抗腫瘤活性機(jī)制研究.pdf

1、癌癥作為一種高致死率的疾病嚴(yán)重危害人類的健康。隨著現(xiàn)代化研究技術(shù)的發(fā)展，運(yùn)用新技術(shù)新方法對(duì)中草藥的抗癌活性成分進(jìn)行研究，對(duì)其抗癌機(jī)制進(jìn)行探明已經(jīng)成為當(dāng)今抗癌藥物研發(fā)的熱點(diǎn)之一，特別在對(duì)新藥及新藥先導(dǎo)化合物的發(fā)現(xiàn)過程中更是起著不可替代的作用。
　　 本研究選用民間長(zhǎng)期使用具有抗腫瘤功效的畬藥毛花獼猴桃作為研究對(duì)象，在本實(shí)驗(yàn)室前期研究的基礎(chǔ)上，對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)分離并研究其氯仿活性部位的抗腫瘤作用機(jī)制。
　　 在化學(xué)成分分

2、離與結(jié)構(gòu)鑒定研究方面，選用毛花獼猴桃根部甲醇粗提物，采用系統(tǒng)溶劑萃取法、經(jīng)薄層層析法、化學(xué)定性顯色反應(yīng)進(jìn)行初步定性鑒別，使用高效液相色譜法從氯仿層有效部位中分離獲得7種單體化合物，再利用13C核磁共振波譜和1H核磁共振波譜，質(zhì)譜等方法對(duì)單體化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)解析，結(jié)果表明化合物1為:2α，3α，24-三羥基烏蘇烷-12-烯-28-烏蘇酸（2α，3α，24-trihydroxyurs-12-en-28-oicacid），化合物2為:2β，3β

3、-二羥基-23-氧代-12-烯-28-烏蘇酸(2p，3p-dihydroxy-23-oxo-urs-12-en-28-oicacid)，化合物4為:2α,3α-二羥基-23-甲氧基.烏蘇烷-12-烯-28-烏蘇酸(2α，3α-dihydroxy-23-methoxy-12-en-28-oicacid)，化合物6為:不飽和脂肪酸。
　　 在體外抗腫瘤活性篩選實(shí)驗(yàn)中，通過體外培養(yǎng)肝癌細(xì)胞株BEL-7404，運(yùn)用MTT比色法、生長(zhǎng)抑制

4、曲線等實(shí)驗(yàn)，分析測(cè)試了毛花獼猴桃根部氯仿層對(duì)肝癌細(xì)胞株的增殖抑制作用，結(jié)果顯示毛花獼猴桃根部氯仿層在體外實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出顯著的抗腫瘤活性。對(duì)肝癌細(xì)胞BEL-7404增殖的抑制作用呈劑量依賴性關(guān)系，其IC50值為114.8}Lg.mL-l。通過顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化，Hoechst33258以及AO/EB細(xì)胞染色實(shí)驗(yàn)，初步判斷毛花獼猴桃根氯仿層可能是通過細(xì)胞壞死途徑抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，并且這種抑制作用與濃度具有密切關(guān)系，低濃度下可選擇性地抑

5、制腫瘤細(xì)胞增殖而對(duì)正常細(xì)胞毒性作用較小。
　　 在體內(nèi)抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)中，建立了H22肝癌小鼠模型，通過測(cè)定抑瘤率來研究毛花獼猴桃根部氯仿層在小鼠體內(nèi)的抗腫瘤作用，結(jié)果顯示給藥劑量為75mg/kg的低劑量組對(duì)H22肝癌小鼠的腫瘤有著明顯的抑制作用，抑瘤率為37.34％，而給藥劑量為150、300mg/kg的中、高劑量組效果不明顯。同時(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示:與正常小鼠組和模型小鼠組比較，毛花獼猴桃根氯仿層有一定的毒性。
　　 本論文