Al(OH)3和CpG ODN免疫佐劑對(duì)丙型肝炎病毒多表位抗原PCX3疫苗免疫效果影響的研究.pdf

1、丙型肝炎病毒(HCV)為單股正鏈RNA病毒，其基因組編碼約3010～3033aa的蛋白前體，從N-端起依次為核心蛋白(C)、包膜蛋白(E)、非結(jié)構(gòu)蛋白NS1-NS5B。HCV具有高度的變異性，能夠迅速突變逃逸宿主的免疫系統(tǒng)。因此，給疫苗的研究帶來許多的困難。近年來的研究提示理想的HCV疫苗必須能夠誘發(fā)高水平、廣譜而特異的體液免疫應(yīng)答和細(xì)胞免疫應(yīng)答。
　　 針對(duì)HCV的高度變異性及免疫特點(diǎn)，在HCV基因產(chǎn)物中優(yōu)選了5個(gè)具有良好免疫

2、原性的高度保守B/T細(xì)胞表位，組合成一個(gè)多表位抗原基因pcx，這些表位分別來自核心蛋白(1～16aa，132～141aa)，E1(126～135 aa)，NS3(139～147aa)及NS5B(768～775aa)，以及破傷風(fēng)毒素的T細(xì)胞表位用以增強(qiáng)T細(xì)胞免疫。pcx基因經(jīng)過串聯(lián)重復(fù)之后，構(gòu)建成多表位抗原基因pcx3，與6×His-tag融合后，在E.coli宿主中獲得高效表達(dá)，并通過Ni2+-NTA-agarose純化。
　　

3、 以HCV蛋白疫苗PCX3為抗原，分別加入Al(OH)，3佐劑，CpG ODN佐劑，以及兩種佐劑聯(lián)合作用的復(fù)合佐劑，對(duì)雄性六周齡BALB/c小鼠進(jìn)行常規(guī)免疫。Al(OH)，3和CpG ODIN復(fù)合佐劑與PCX3抗原聯(lián)合作用組與其他免疫組相比，在ELISA檢測(cè)小鼠血清中特異性IgG和IgM抗體實(shí)驗(yàn)中，該組小鼠產(chǎn)生的特異性IgG(1×106)和IgM(1×105)抗體滴度最高，持續(xù)時(shí)間最長；在非放射性細(xì)胞毒活性檢測(cè)試劑盒檢測(cè)NK細(xì)胞的自然殺