大熊貓生長激素基因的植物表達載體構建及其在煙草中的遺傳表達.pdf

1、大熊貓(Ailuropodamelanoleuca)是世界上最著名的瀕危動物之一，也是世界生物多樣性保存的象征。與其它哺乳動物相比，新生小熊貓有先天性未成熟特性，結果其夭折率很高。由于其自然繁殖率低和種群數(shù)量少，以及高夭折率而導致的低存活率，使得大熊貓易受棲息地侵犯及毀壞等種種威脅。因此，為提高熊貓種群數(shù)量，發(fā)展人工繁殖技術并增加繁殖率和減少夭折率是至關重要的。對大熊貓生長激素的功能研究有助于理解大熊貓生長激素基因調控的分子基礎。并且在

2、真核生物表達系統(tǒng)里生產(chǎn)重組Am-GH將給動物生物技術應用重組GH提供了基礎。 植物反應器生產(chǎn)藥物成本低，具有改變傳統(tǒng)制藥方法的光明前景。本研究以PCR法克隆了大熊貓生長激素基因Am-GH基因，并構建了植物表達載體pCAMBIA13011-GH，通過根癌農(nóng)桿菌GV3101的介導將其導入煙草無菌葉片外植體。經(jīng)過四輪潮霉素(Hygromycin，Hyg)遞增篩選，獲得抗性植株。通過GUS，PCR檢測、Southern雜交，初步鑒定Am