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文檔簡介
1、用PBS(pH7.2)緩沖液提取8種貝類凝集素,經(jīng)50％硫酸銨分級沉淀凍干后,配成一定濃度的樣品,并以12種動物及人的紅細胞、5種單細胞藻類和10種微生物細胞檢測各凝集素的凝集活力,以尋找活力較強的凝集素來源。結(jié)果發(fā)現(xiàn),各種凝集素間存在著明顯的差異,香螺(Neptunea cumingi)的凝集活力最強。綜合各凝集素的凝集效果,最終選定家兔紅細胞為最敏感的細胞。
以香螺為材料,經(jīng)50％硫酸銨分級沉淀、DEAE-Sephar
2、ose離子交換層析、Sephacryl S-200-HR分子篩層析,得到純的香螺凝集素(NCL)。測定NCL的分子量、含糖量、等電點、紫外吸收光譜、氨基酸組成,研究糖結(jié)合專一性、pH及溫度、EDTA、金屬離子和鹽度等對NCL的影響。同時,對NCL進行熒光光譜學(xué)研究,分析NCL內(nèi)源熒光光譜,檢測了NCL凝集活性的熱穩(wěn)性和不同pH值溶液對其內(nèi)部結(jié)構(gòu)的影響。熒光淬滅發(fā)現(xiàn)KI無法淬滅NCL的內(nèi)源熒光,而丙烯酰胺和CsCl卻可以,說明NCL分子中
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