黃花石蒜凝集素的純化及性質(zhì)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、黃花石蒜球莖經(jīng)勻漿、浸取、硫酸銨分級(jí)沉淀、陰離子交換柱(DEAE-Sepharose)和SephacrylS-200分子篩層析得到經(jīng)SDS-PAGE檢測(cè)為單一蛋白帶的黃花石蒜凝集素(Lycorischinensisagglutinin,LCA)純品。經(jīng)SephacrylS-200凝膠過(guò)濾和SDS-PAGE測(cè)得其表觀分子量為48KD,亞基分子量為12KD,表明LCA是由四個(gè)相同亞基組成的蛋白。LCA只凝集兔血細(xì)胞,其凝集兔血細(xì)胞效價(jià)為0.

2、95ug/ml,但是對(duì)雞血及人A、B、AB、O型血均不凝集。其凝血活性部分依賴于金屬離子Ca2+、Mg2+。糖抑制實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,甘露聚糖是LCA的專一性抑制糖,其次是甘露糖?! ⊙芯苛瞬煌瑴囟?、pH和變性劑對(duì)LCA凝血活性和熒光光譜的變化,當(dāng)溫度達(dá)80℃以上時(shí),活性開始下降,100℃處理20分鐘,LCA仍保留60%活性;pH為4-12對(duì)活性的影響不大,pH為2時(shí),完全喪失活性;溫度的升高和pH的改變對(duì)熒光光譜影響不大。表明LCA對(duì)熱,

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