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文檔簡介
1、目的:
觀察AD模型大鼠行為學,海馬組織形態(tài)學及BDNF、TrKB基因和蛋白表達的變化。探討海馬神經(jīng)元損傷與AD的關系,以及壽爾智膠囊對上述變化的保護機制。
方法:
隨機將40只健康雄性SD大鼠分成假手術組、模型組、壽爾智組、安理申組,每組10只;采用小動物腦立體定位儀,經(jīng)大鼠海馬體表投影位置向海馬CA1區(qū)注射聚集態(tài)Aβ25-35構建AD模型大鼠;造模3天后,壽爾智組給予壽爾智膠囊灌胃,安理申組
2、給予安理申灌胃,模型組與假手術組給予等體積生理鹽水灌胃;治療四周后,運用Morris水迷宮測試大鼠的學習和記憶能力;結束后,用HE染色觀察大鼠海馬CA1區(qū)組織形態(tài)學;免疫組化染色測定大鼠海馬CA1區(qū)BDNF及其受體TrkB的表達;Real-timeQuantitative PCR法測定大鼠海馬組織BDNF mRNA、TrKB mRNA的表達,并觀察壽爾智膠囊對上述指標的影響。
結果:
1.學習記憶能力測試:定
3、位航行試驗中,各組大鼠5天的平均逃避潛伏期都有所下降,假手術組、壽爾智組和安理申組三組大鼠都較模型組明顯縮短(P<0.05或P<0.01);壽爾智組、安理申組與假手術組三組之間比較差異均不顯著(P>0.05)??臻g探索試驗中,以各組大鼠在原平臺象限活動時間和穿越原平臺次數(shù)為指標,假手術組、壽爾智組和安理申組三組大鼠都較模型組明顯增加(P<0.05或P<0.01);壽爾智組、安理申組與假手術組三組之間比較差異均不顯著(P>0.05)。
4、r> 2.大鼠海馬組織HE染色:模型組大鼠海馬CA1區(qū)細胞結構紊亂,數(shù)目明顯減少,排列不整齊;壽爾智組、安理申組和假手術組三組大鼠海馬CA1區(qū)細胞結構完整,排列整齊,但前兩者較后者在海馬CA1區(qū)細胞結構、數(shù)目、排列上都稍差。
3.大鼠海馬組織石蠟切片免疫組化染色:以各組大鼠海馬CA1區(qū)BDNF、TrKB陽性細胞平均光密度為觀察指標,假手術組、壽爾智組和安理申組三組大鼠都較模型組明顯增加,胞漿染色較深,差異有顯著性(P
5、<0.01);壽爾智組和安理申組與假手術組大鼠比較明顯減少,胞漿染色稍淡,差異有顯著性(P<0.01);壽爾智組與安理申組比較差別不顯著(P>0.05)。
4.大鼠海馬組織BDNF、TrKB基因的測定:各組大鼠海馬組織BDNFmRNA、TrKB mRNA的表達,假手術組、壽爾智組和安理申組三組都較模型組明顯增加(P<O.05);壽爾智組和安理申組仍低于假手術組(P<0.05);壽爾智組較安理申組差別不明顯(P>0.05)。
6、
結論:
1.大鼠雙側海馬注射Aβ25-35構建的AD模型穩(wěn)定可靠,重復性好。
2.AD模型大鼠學習和記憶功能障礙的形態(tài)學基礎可能是海馬神經(jīng)元等結構的損傷和丟失。
3.壽爾智膠囊有補腎填精,活血祛瘀,化痰開竅之功效,其對AD模型大鼠學習記憶能力的改善作用可能與其在一定程度上抑制Aβ25-35在大鼠腦內的沉積,減輕對海馬神經(jīng)元的毒性損傷有關。
4.AD模型大鼠海馬神經(jīng)元
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