內(nèi)皮素A受體在卵巢癌癌痛傳導(dǎo)中的作用.pdf

1、背景：卵巢上皮性腫瘤是女性生殖系統(tǒng)腫瘤中較為常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率很高，僅次于宮頸癌和子宮體癌而位于第三位，但是卵巢癌死亡率確占各類婦科腫瘤的首位，嚴(yán)重地威脅著女性的生命。卵巢癌發(fā)病隱匿，病因不明，病人早期多無明顯癥狀，又由于卵巢位于盆腔內(nèi)，一般婦科檢查不易觸及，一經(jīng)發(fā)現(xiàn)大多病人都屬于晚期，臨床治療效果差，卵巢癌病人的五年生存率低。但隨著醫(yī)學(xué)診斷和治療的不斷發(fā)展，卵巢癌病人的生存時(shí)間延長，75％-95%晚期患者都會(huì)出現(xiàn)不同程度癌性

2、疼痛的表現(xiàn)，因此如何減輕和解除卵巢癌癌癥病人的疼痛已成為癌癥臨床治療的重要組成部分。
　　癌痛是晚期卵巢癌病人的常見癥狀，嚴(yán)重影響病人的生活質(zhì)量，因此控制癌痛作為癌癥治療的重要部分，已得到充分重視，目前臨床上治療癌痛嚴(yán)格按照WHO規(guī)定三階梯癌癥疼痛治療方案，遵循從弱到強(qiáng)、從少到多地使用阿片類鎮(zhèn)痛劑。該治療方案雖有規(guī)律可循，但存在著嚴(yán)重的不良反應(yīng)和毒副作用，如消化道反應(yīng)、神經(jīng)毒性作用、藥物濫用等。由于癌痛發(fā)生的復(fù)雜性和阿片類藥物的用

3、藥局限性，因此我們需要尋找新的癌痛的治療靶點(diǎn)，而選擇癌痛傳導(dǎo)通路中低位的安全性高效果專一的靶點(diǎn)是解決這一問題的新方向。
　　目的：
　　1、研究?jī)?nèi)皮素A受體（ETAR）在卵巢癌模型小鼠的疼痛傳導(dǎo)中作用。
　　2、研究鞘內(nèi)給予內(nèi)皮素受體激動(dòng)劑（ET）及內(nèi)皮素受體拮抗劑（BQ123）后對(duì)卵巢癌模型鼠背根神經(jīng)節(jié)（DRG）中p38MARK表達(dá)的變化。
　　方法：
　　1、選用5周齡未交配的雌性BALB-C小鼠40只

4、，體重25g左右，采用隨機(jī)數(shù)字表法，隨機(jī)分為四組（n=10），分別為假手術(shù)組、模型對(duì)照組、模型+ET組、模型+BQ123組。背側(cè)入路法于小鼠左側(cè)卵巢接種腹水瘤S180腫瘤細(xì)胞建立小鼠原位卵巢癌移植模型。模型+ET組和模型+BQ123組于術(shù)后第9天、第11天、第13天分別鞘內(nèi)給予內(nèi)皮素（ET）、BQ123，一天一次。
　　2、應(yīng)用Von-Frey纖維機(jī)械刺激器于手術(shù)前（第0天）、術(shù)后第7天、第9天（給藥后第1天）、第11天（給藥后第

5、3天）、第13天（給藥后第5天）觀察不同分組小鼠機(jī)械性縮足反應(yīng)的閾值（MWT）。
　　3、于第13天給藥后處死小鼠，取腰段背根神經(jīng)節(jié)，免疫組化法測(cè)定內(nèi)皮素A受體（ETAR）、p38陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)，Westernblot測(cè)定p38的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1、模型對(duì)照組對(duì)比于假手術(shù)組小鼠MWT值于術(shù)后第5-12天下降。與模型組對(duì)比，模型+ET組于第7天鞘內(nèi)給予ET的小鼠MWT無明顯變化（P＞0.05）。但模型+BQ123組

6、可部分緩解卵巢癌疼痛引起的機(jī)械痛敏（P＜0.01）。
　　2、模型對(duì)照組小鼠DRG神經(jīng)元中ETAR、p38的陽性細(xì)胞數(shù)比假手術(shù)組小鼠高（P＜0.01），模型+ET組小鼠DRG神經(jīng)元中ETAR、p38的陽性細(xì)胞數(shù)比模型對(duì)照組高（P＜0.01），模型對(duì)照組小鼠DRG神經(jīng)元中ETAR、p38的陽性細(xì)胞數(shù)比模型+BQ123組小鼠高（P＜0.01）。
　　3、模型對(duì)照組小鼠DRG神經(jīng)元中p38蛋白的表達(dá)量比假手術(shù)組小鼠高（P＜0.01

7、），模型+ET組小鼠DRG神經(jīng)元中p38蛋白的表達(dá)量比模型對(duì)照組小鼠高（P＜0.01），模型對(duì)照組小鼠DRG神經(jīng)元中p38蛋白的表達(dá)量比模型+BQ123組小鼠高（P＜0.01）。
　　結(jié)論：
　　1、鞘內(nèi)注射ETAR拮抗劑可部分緩解卵巢癌小鼠的機(jī)械痛敏。提示內(nèi)皮素A受體可能參與了卵巢疼痛的發(fā)生
　　2、鞘內(nèi)給予ETAR激動(dòng)劑和拮抗劑的卵巢癌小鼠DRG神經(jīng)元中p38分別表達(dá)上調(diào)和下降，推測(cè)ETAR在疼痛傳導(dǎo)過程中可能會(huì)促