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1、本實(shí)驗(yàn)旨在研究胃旁路術(shù)(RXGBPS)對(duì)鏈脲霉菌素(streptozotocin,STZ)所致非肥胖型糖尿病小鼠模型血糖的影響,及在該過程中胰島祖細(xì)胞所發(fā)生的變化。探討血糖變化和胰島祖細(xì)胞變化以及體重變化等的相互關(guān)系。
方法:
成年雄性C57BL/6小鼠經(jīng)腹腔注射STZ(200mg/kg),建立非肥胖型糖尿病模型。成模后小鼠40只隨機(jī)分為3組:GBP手術(shù)組(DMOP組)16只、假手術(shù)組(DMFOP組)16只、
2、未處理組(DM組)8只,另設(shè)立正常對(duì)照組3組:正常未手術(shù)組(N組)8只、正常假手術(shù)組(NFOP組)8只和正常手術(shù)組(NOP)8只。DMOP組及DMFOP組內(nèi)小鼠手術(shù)時(shí)間是STZ注射后第十天。分別測(cè)術(shù)前,術(shù)后第1、2、3、4、5、6周同一時(shí)間點(diǎn)各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的隨機(jī)血糖及體重,同時(shí)監(jiān)測(cè)飲水及尿量的變化。分別取術(shù)后第1、2、3、4周DMOP組中血糖下降明顯及不明顯的小鼠各一只,及于術(shù)后第4周隨機(jī)抽取DM組、DMFOP組、N組,NOP組、NFOP
3、組中小鼠一只,處死后取胰腺組織,通過HE染色和免疫熒光,觀察組織學(xué)變化。
結(jié)果:
(1)與DM、DMFOP組相比,DMOP組的小鼠血糖下降明顯,并可以維持到術(shù)后6周以上(實(shí)驗(yàn)觀察結(jié)束)。(2)GBP手術(shù)后,糖尿病小鼠的體重回升,多飲、多尿的癥狀好轉(zhuǎn)。(3)DMFOP組(15/16)與DMOP組(2/16)比較,小鼠圍手術(shù)期死亡率差異明顯(p<0.01)。(4)HE染色發(fā)現(xiàn):與對(duì)照組小鼠相比,術(shù)后第四周的DMO
4、P組小鼠胰島形態(tài)接近正常胰島,并出現(xiàn)新生的小胰島,多分布在胰腺導(dǎo)管周圍。(5)免疫熒光染色顯示:胰島數(shù)目增加,胰島素免疫熒光發(fā)現(xiàn)較多孤立的及由兩三個(gè)胰島素陽性細(xì)胞組成的小胰島。胰島素和胰高血糖素免疫熒光雙標(biāo)發(fā)現(xiàn)在部分胰島內(nèi)存在胰島素和胰高血糖素雙陽性(INS+/GLU+)的細(xì)胞,目前,胰島素和胰高血糖素雙陽性細(xì)胞被認(rèn)為是未成熟型內(nèi)分泌前體細(xì)胞。同時(shí),免疫熒光染色還發(fā)現(xiàn)胰腺組織內(nèi)散在的表達(dá)Ngn3的細(xì)胞。Ngn3是內(nèi)分泌祖細(xì)胞表達(dá)的標(biāo)記物
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