斑馬魚肌內(nèi)注射海分枝桿菌致結(jié)核性創(chuàng)面及皮下竇道形成機(jī)制的初步探究.pdf

1、目的：通過成年斑馬魚背部肌內(nèi)注射海分枝桿菌建立結(jié)核性創(chuàng)面模型，初步探討結(jié)核性創(chuàng)面的發(fā)病及皮下竇道形成機(jī)制。
　　方法：采用成年斑馬魚背部肌內(nèi)注射1.095×104cfu海分枝桿菌方法建立結(jié)核性創(chuàng)面模型，通過活體肉眼跟蹤觀察、組織病理、抗酸染色來驗(yàn)證該動(dòng)物模型，并采用高通量測序技術(shù)檢測結(jié)核性創(chuàng)面斑馬魚組織內(nèi)基因的差異表達(dá)。
　　結(jié)果：活體跟蹤肉眼觀察20周，實(shí)驗(yàn)組中71.4％(5/7)的斑馬魚出現(xiàn)深達(dá)肌層的創(chuàng)面，創(chuàng)面最早均出現(xiàn)

2、在背部注射點(diǎn)附近，起初可見皮膚局部輕度紅腫，隨病程進(jìn)展，皮膚紅腫加重,一旦腫物破裂后可形成圓形創(chuàng)面，除了背部，后期創(chuàng)面也可出現(xiàn)在側(cè)腹部，平均出現(xiàn)創(chuàng)面時(shí)間為注射后59天，2周后創(chuàng)面仍不愈合；創(chuàng)面組織學(xué)研究顯示在肌肉組織中有大量上皮樣細(xì)胞聚集成團(tuán)，形成類肉芽腫病灶；抗酸染色結(jié)果顯示大量抗酸桿菌聚集在創(chuàng)面周圍的完整皮膚內(nèi)；高通量測序發(fā)現(xiàn)：海分枝桿菌感染致結(jié)核性創(chuàng)面斑馬魚炎癥相關(guān)基因:白介素-1、腫瘤壞死因子-α表達(dá)量顯著上調(diào)，穿孔素基因表達(dá)量