耐藥結(jié)核分枝桿菌的多維分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、為了解中國耐多藥結(jié)核桿菌的利福平耐藥基因rpoB突變特征,我們應(yīng)用DNA測序技術(shù)分析86株結(jié)核分枝桿菌臨床分離株ropB基因利福平抗藥性決定區(qū)域(rifampin resistance determining region,RRDR)和V176F突變特征,72個(gè)耐藥分離株中的65個(gè)菌株中的rpoB基因的RRDR內(nèi)發(fā)現(xiàn)22種不同類型突變,21種點(diǎn)突變和一個(gè)插入突變.最常見突變位點(diǎn)531(41％),526(40％),和516(4％).10％

2、耐藥分離株未發(fā)現(xiàn)突變.新發(fā)現(xiàn)RRDR內(nèi)六個(gè)新的等位基因,以及RRDR外部五個(gè)新的突變.所有分離菌株均不包含V176突變.其結(jié)果有助于發(fā)展耐多藥結(jié)核病快速分子診斷方法和確定中國的耐多藥結(jié)核病原發(fā)熱點(diǎn)地區(qū),從而采取有效結(jié)核病控制策略.DNA微陣列代表聚合酶鏈反應(yīng)產(chǎn)物診斷測序發(fā)展方向.由于高密度微陣列價(jià)格昂貴,分析操作復(fù)雜,和結(jié)果難于解釋、限制其臨床實(shí)驗(yàn)室里廣泛地運(yùn)用.我們試圖建立一種中等的密度陣列方法,可快速地鑒定結(jié)核分枝桿菌利福平耐藥菌株

3、.我們首次應(yīng)用高效液相色譜結(jié)合MALDT-MS質(zhì)譜分析INH耐藥和敏感菌株的分泌蛋白的差異,通過DEAE親和色譜去除培養(yǎng)基上清液牛血清白蛋白后,從異煙肼耐藥結(jié)核桿菌培養(yǎng)上清液中鑒定一種特征性分泌蛋白,海藻糖磷酸磷酸酶(Trehalose-phosphate Phosphatase,TPP),分子量46KDa,PI5.3.為了鑒定異煙肼耐藥結(jié)核分枝桿菌特異的蛋白,我們應(yīng)用雙向電泳和MALDI-MS質(zhì)譜蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)比較分析2株異煙肼耐藥結(jié)

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