三維組織化肝細(xì)胞模型反映非諾貝特的體內(nèi)作用.pdf

1、隨著人們生活水平的提高，高血脂已經(jīng)成為常見的現(xiàn)象。它是引起人類動脈粥樣硬化等疾病的主要因素之一。因此，世界各國都很重視降脂藥物的研發(fā)。肝臟是體內(nèi)脂肪代謝的重要器官，也是降血脂藥物調(diào)節(jié)脂肪代謝的主要作用位點(diǎn)和產(chǎn)生毒性的靶器官。在降血脂藥物的研發(fā)過程中，藥物對肝臟脂肪代謝的影響（即藥效）和毒性是重點(diǎn)考察的內(nèi)容。然而，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)成本高、周期長，因此需要有效的肝細(xì)胞體外培養(yǎng)模型，作為降脂藥物藥理和毒性評價(jià)的早期篩選工具。目前，已有的體外肝細(xì)胞模型

2、包括三明治、聚球體和單層貼壁等。然而這些模型都有不可避免的缺陷，如三明治模型細(xì)胞間缺乏間隙連接，聚球體模型制備方法復(fù)雜、重復(fù)性差。而應(yīng)用最廣泛的單層貼壁模型，雖然操作方便且重復(fù)性好，但是由于缺乏與體內(nèi)類似的微環(huán)境，其脂肪代謝水平與肝臟差異較大，且對藥效和毒性也不夠敏感，不僅如此，單層貼壁與三明治培養(yǎng)的肝細(xì)胞內(nèi)脂肪代謝相關(guān)基因表達(dá)水平與體內(nèi)肝細(xì)胞有較大區(qū)別。
　　 本文針對已有肝細(xì)胞體外模型的缺點(diǎn)，采用由本實(shí)驗(yàn)室自主研發(fā)，細(xì)胞間微

3、環(huán)境更接近體內(nèi)，并能長期維持細(xì)胞功能的三維凝膠包埋培養(yǎng)模型，進(jìn)行肝細(xì)胞脂肪代謝以及典型降血脂藥物-非諾貝特藥理與毒理的體外研究，并通過與單層貼壁模型以及體內(nèi)情況的對比驗(yàn)證該模型的可靠性，
　　 本文首先考察單層貼壁和凝膠包埋模型中肝細(xì)胞脂肪代謝的差別，發(fā)現(xiàn)凝膠包埋的肝細(xì)胞脂肪代謝更接近體內(nèi)肝臟，證明了其作為脂肪代謝體外模型的可行性。其次，利用兩種模型研究了非諾貝特的藥理，結(jié)果顯示非諾貝特對凝膠包埋培養(yǎng)肝細(xì)胞的脂肪代謝有明顯的調(diào)節(jié)

4、作用，但在單層貼壁培養(yǎng)模型無法體現(xiàn)。隨后，本文評價(jià)了非諾貝特對兩種模型肝細(xì)胞的短期毒性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)凝膠包埋培養(yǎng)的肝細(xì)胞對非諾貝特的毒性更為敏感，且能正確反映體內(nèi)毒性作用。而單層貼壁模型低估了非諾貝特應(yīng)有的毒性。最后，采用能長期維持肝細(xì)胞功能的凝膠包埋模型進(jìn)行了非諾貝特的長期毒性研究。結(jié)果顯示，凝膠包埋模型能夠反映非諾貝特的長期毒性和毒理，并同時(shí)顯示了其毒理與其藥理的關(guān)聯(lián)性。
　　 總之，凝膠包埋模型能較好地模擬體內(nèi)脂肪代謝，體現(xiàn)降