GPR126在青少年特發(fā)性脊柱側(cè)凸中基因多態(tài)性及PUMC分型關(guān)聯(lián)性研究.pdf

1、青少年特發(fā)性脊柱側(cè)凸(Adolescent Idiopathic Scoliosis，AIS)是一種最常見的脊柱畸形，全球范圍內(nèi)發(fā)病率約為1％-3％。臨床上有多種分類標(biāo)準(zhǔn)，如King分型、Lenke分型和PUMC分型，其中PUMC分型是基于脊柱三維畸形、并具有手術(shù)指導(dǎo)意義的分型系統(tǒng)。盡管AIS的研究進(jìn)行了數(shù)十年，確切的病因尚不清楚。研究表明遺傳傾向在AIS的發(fā)病中起重要作用，近期在日本大規(guī)模人群和中國南方人群的全基因組關(guān)聯(lián)性分析研究提示

2、GPR126基因單核苷酸多態(tài)性(SingleNucleotide Polymorphism，SNP)與AIS發(fā)病相關(guān)。Kou等在1819例日本患者及25939例對(duì)照中發(fā)現(xiàn)rs6570507與AIS的易感性相關(guān)聯(lián)，同時(shí)發(fā)現(xiàn)gpr126基因沉默斑馬魚模型中出現(xiàn)骨化延遲。Xu等在352例南方中國人群患者及149例對(duì)照中重復(fù)出了此位點(diǎn)，并發(fā)現(xiàn)了另外兩個(gè)關(guān)聯(lián)位點(diǎn)（rs7774095和rs7755109）。Qin等發(fā)現(xiàn)在南方中國人群AIS患者中，另

3、一位點(diǎn)(rs9403380)能夠調(diào)節(jié)GPR126在脊旁肌中的表達(dá)。由于在Schwann細(xì)胞髓鞘形成起到重要作用，gpr126對(duì)于小鼠的存活必不可少，也有研究提示gpr126在軟骨中的缺失會(huì)導(dǎo)致特發(fā)性脊柱側(cè)凸及漏斗胸的小鼠。由此可見，GPR126基因在AIS發(fā)病中起重要作用。目前尚無中國北方漢族人群中的GPR126基因關(guān)聯(lián)研究報(bào)道。本研究以中國北方漢族人群為研究對(duì)象，通過病例-對(duì)照人群的關(guān)聯(lián)分析研究，探尋GPR126基因SNP位點(diǎn)對(duì)AIS

4、發(fā)病的貢獻(xiàn)，同時(shí)結(jié)合基因型-表型關(guān)聯(lián)研究，希望發(fā)現(xiàn)不同SNP與PUMC不同亞組的易感性。
　　研究目的：
　　1.建立中國北方漢族人群AIS遺傳病因?qū)W研究隊(duì)列。
　　2.完善GPR126基因中與AIS相關(guān)聯(lián)的單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)。
　　3.針對(duì)關(guān)聯(lián)位點(diǎn)進(jìn)行功能分析，探尋其潛在致病機(jī)理。
　　4.結(jié)合PUMC分型進(jìn)行亞組分析，探索臨床應(yīng)用價(jià)值。
　　研究方法：
　　在前期研究基礎(chǔ)上繼續(xù)收集就診于北京

5、協(xié)和醫(yī)院骨科的AIS患者的臨床資料和外周血樣標(biāo)本，擴(kuò)大研究隊(duì)列。通過文獻(xiàn)檢索回顧及公共數(shù)據(jù)庫預(yù)測，確定GPR126基因區(qū)域候選SNP位點(diǎn)。提取患者及對(duì)照組樣本全基因組DNA，使用Sequenom MassArray分型平臺(tái)，對(duì)候選基因SNP進(jìn)行分型，并使用Plink及SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。針對(duì)關(guān)聯(lián)位點(diǎn)，使用雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)研究其對(duì)于基因轉(zhuǎn)錄功能的潛在影響。結(jié)合PUMC分型，對(duì)功能位點(diǎn)進(jìn)行亞組分析研究，確定與基因型相關(guān)聯(lián)的臨床亞組

6、表型。
　　研究結(jié)果：
　　1.本研究納入了480例AIS患者及861例正常對(duì)照，選取GPR126基因14處SNP位點(diǎn)。
　　2.位點(diǎn)rs225694、rs7774095和rs2294773的風(fēng)險(xiǎn)等位基因與AIS相關(guān)聯(lián)。
　　3.通過雙熒光素酶報(bào)告試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，位點(diǎn)rs225694和rs7774095對(duì)于基因的轉(zhuǎn)錄具有潛在的條件作用。
　　4.亞組分析中，rs225694的等位基因A與所有PUMC亞型AIS相關(guān)

7、聯(lián)，rs7774095的等位基因A僅與PUMCⅠ型AIS相關(guān)聯(lián)。
　　研究結(jié)論：
　　1.中國北方漢族人群中，位點(diǎn)rs225694、rs7774095和rs2294773的風(fēng)險(xiǎn)等位基因與AIS相關(guān)聯(lián)。而位點(diǎn)rs225694和rs7774095具有潛在的調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄功能。
　　2.Rs225694與所有PUMC亞型AIS相關(guān)聯(lián)，rs7774095與PUMCⅠ型AIS相關(guān)聯(lián)。
　　3.GPR126易感SNP與PUMC