5-氨基酮戊酸脂質(zhì)體凝膠的研究.pdf

1、光動力療法(Photodynamic therapy,PDT)開創(chuàng)于二十世紀七十年代,近年來由于光敏物質(zhì)等的發(fā)展和進步,PDT已逐步成為治療腫瘤的基本手段之一[1],其治療基礎為先給予機體對腫瘤組織有選擇性攝入作用的光敏劑,然后用特定波長激光照射腫瘤組織,誘發(fā)光敏劑的光化學反應生成活性很強的單線態(tài)氧,進而和生物大分子發(fā)生氧化反應,產(chǎn)生細胞毒作用以殺滅腫瘤細胞而顯示治療作用。與手術、放療、化療及免疫治療等腫瘤傳統(tǒng)療法相比,光動力學治療最大

2、的優(yōu)點是可對癌組織進行選擇性破壞,副作用較小。自從1990年加拿大學者Kennedy首次把5-氨基酮戊酸(5-aminolevulinie acid,5-ALA)應用于腫瘤消融療法以來[2],5-ALA已逐漸成為臨床最常用的光敏劑。
　　 作為第二代光敏劑,5-ALA是一種內(nèi)源性的光動力治療藥物,由于具有不良反應小、療效確切等優(yōu)點,已廣泛應用于腫瘤、癌前病變及一些非腫瘤性皮膚疾病的治療,在某些增生性疾病、病毒性疾病和炎癥性疾病的

3、治療及美容和光嫩膚等方面也有較多應用報道。由于5-ALA是極性化合物,皮膚滲透性較低,使其很難達到皮膚組織的靶部位。在臨床治療上一般采用較高濃度的20％5-ALA,但有60%～80%的臨床患者會產(chǎn)生光毒性的副作用[3].如果能夠通過增強5-ALA的滲透性提高光動力治療的效率,降低其用量,則有可能減少其光毒性的發(fā)生率。脂質(zhì)體作為藥物載體對于藥物的透皮吸收,降低毒副作用可以發(fā)揮得更好。部分親水性藥物可通過與磷脂結合而提高其脂溶性,增強皮膚和

4、組織滲透性,從而增強藥理作用,提高其生物利用度[4],通過制備5-ALA脂質(zhì)體可增加其皮膚透過率進入靶組織而充分發(fā)揮其療效。
　　 考慮到鹽酸5-ALA具有較好的水溶性,為了得到較高的包封率,本實驗采用主動載藥法中的pH梯度法制備其脂質(zhì)體。為下一步相關研究奠定基礎,并對其組分和制備工藝進行了研究。然后制得5-ALA皮膚局部給藥脂質(zhì)體凝膠,并對其進行基礎考察。
　　 第一部分建立了5-ALA含量測定的紫外分光光度法及高效液

5、相色譜法,其中由于5-ALA和脂質(zhì)相在紫外吸收上的相互干擾,最終采用了高效液相色譜法測定5-ALA的的含量。色譜條件:Hypersil ODS柱(4.6×250mm,5μm);柱溫為25℃;流動相為50mmol·L-1(NH4)H2PO4(pH2.2)/甲醇=98/2。UV檢測波長為267nm,流速為1.0mL·min-1。濃度與峰面積之間成良好線性關系、符合分析要求。
　　 第二部分采用了葡聚糖G-50凝膠柱層析法分離脂質(zhì)體和

6、游離藥物,高效液相色譜法測定藥物含量的方法,并以包封率為指標,在單因素考察的基礎上,通過正交設計實驗確定了5-ALA脂質(zhì)體的基本處方和工藝,考察磷脂膽固醇質(zhì)量比、藥脂比和孵育溫度等因素對包封率的影響,確定了最佳處方:卵磷脂與膽固醇的質(zhì)量比為6:1,卵磷脂與5-ALA質(zhì)量比為6:1,孵育溫度為60℃,最佳處方的平均包封率為65.0%。
　　 第三部分對所制得的5-ALA脂質(zhì)體進行了表征,主要考察了脂質(zhì)體形態(tài)、粒徑和粒度分布等評價指

7、標。形態(tài)學主要是自然觀察法和負染法,可以看到脂質(zhì)體外觀呈圓球形、橢圓形或不規(guī)則的球粒;5-ALA脂質(zhì)體粒徑平均值為100nm,多分散系數(shù)(PI)為0.224,說明粒徑分布均勻;5-ALA脂質(zhì)體帶較低的負電荷,平均Zeta電位-40.6mv,比較穩(wěn)定。
　　 第四部分確定了5-ALA脂質(zhì)體凝膠的制備方法,并對其性能進行研究?？疾炝酥|(zhì)體凝膠的外觀、離心沉降、粘度和皮膚刺激性等指標,結果顯示脂質(zhì)體凝膠的制備具有可行性。根據(jù)中國藥典釋