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文檔簡介
1、背景:
現(xiàn)有證據(jù)表明,在睡眠剝奪期間與清醒期間有著不同的基因表達。睡眠剝奪對5-HT、DA等神經(jīng)遞質(zhì)的改變已有相關(guān)的研究,但它們之間的平衡轉(zhuǎn)換和協(xié)同作用的調(diào)節(jié)機制目前尚不清楚。
目的:
通過檢測大鼠在不同時間睡眠剝奪三個腦區(qū)(海馬、下丘腦、紋狀體)5-HT受體1A、DA受體D1基因和DA受體D2基因表達改變情況,分析睡眠剝奪對這些基因表達的影響,探討不同神經(jīng)遞質(zhì)通路參與睡眠調(diào)節(jié)的差異。
方法:
2、r> 1、選擇10周齡雄性SD大鼠24只。分別進行24小時、48小時、72小時REM睡眠剝奪。
2、采用曠場實驗檢測動物潛伏期、水平分數(shù)、直立次數(shù)。驗證睡眠剝奪體力和精神疲勞模型。
3、每組取大鼠海馬、下丘腦、紋狀體三個腦區(qū)腦組織,利用RT-PCR技術(shù)分別檢測5羥色胺1A受體和多巴胺D1R、D2R基因的表達情況。
4、應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計軟件對實驗數(shù)據(jù)進行相應(yīng)的統(tǒng)計與處理。計量資料進行統(tǒng)計分析選用均數(shù)
3、±標(biāo)準(zhǔn)差((x)±s)。兩組間均數(shù)進行對比與分析采用獨立樣本t驗;多組間均數(shù)進行比較采用單因素方差分析,進行兩兩比較采用LSD檢驗,進行相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān),P<0.05表示統(tǒng)計結(jié)果的差異具有顯著性。
結(jié)果:
1、SD大鼠經(jīng)過睡眠剝奪后進行曠場實驗,水平得分及垂直得分均有很大的波動,大鼠對環(huán)境的認知能力明顯下降,體力、精神疲勞。說明睡眠剝奪對機體的精神活動產(chǎn)生抑制。
2、睡眠剝奪影響了大鼠海馬(
4、F=56.203,P=0.000)和紋狀體(F=77.288,P=0.000)區(qū)域5-HT1A的基因表達,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義,在海馬和紋狀體區(qū)域各睡眠剝奪組大鼠的表達量均高于對照組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),在海馬剝奪72小時組高于剝奪24小時(P=0.005)和48小時(P=0.010)組,紋狀體區(qū)域則各組動物的差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。各組大鼠下丘腦區(qū)域5-HT1A的基因表達差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)
5、。
3、睡眠剝奪影響了大鼠海馬(F=74.708,P=0.000)、紋狀體(F=80.687,P=0.000)區(qū)域D2基因的表達,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義,各睡眠剝奪組大鼠在海馬和紋狀體區(qū)域的表達量均低于對照組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),剝奪時間長的動物基因表達量也更低,海馬與紋狀體腦區(qū)基因表達量各組動物的差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05)。各組大鼠下丘腦區(qū)域D2R的基因表達表達差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。<
6、br> 4、相關(guān)分析顯示對照組各腦區(qū)5-HT1A和D2R基因的表達不存在相關(guān)性,睡眠剝奪24小時在海馬(r=-0.868,P=0.025)、紋狀體(r=-0.883,P=.02)、下丘腦(r=-0.841,P=0.036)兩個基因的表達均呈負相關(guān),睡眠剝奪48小時和72小時在海馬(r=-0.881,P=0.02; r=-0.878, P=0.021)、紋狀體(r=-0.735,P=0.006; r=-0.855, P=0.03)兩個基
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