睡眠剝奪對大鼠不同腦區(qū)5羥色胺1A受體、多巴胺受體基因表達的影響.pdf

1、背景：
　　現(xiàn)有證據(jù)表明，在睡眠剝奪期間與清醒期間有著不同的基因表達。睡眠剝奪對5-HT、DA等神經(jīng)遞質(zhì)的改變已有相關(guān)的研究，但它們之間的平衡轉(zhuǎn)換和協(xié)同作用的調(diào)節(jié)機制目前尚不清楚。
　　目的：
　　通過檢測大鼠在不同時間睡眠剝奪三個腦區(qū)（海馬、下丘腦、紋狀體）5-HT受體1A、DA受體D1基因和DA受體D2基因表達改變情況，分析睡眠剝奪對這些基因表達的影響，探討不同神經(jīng)遞質(zhì)通路參與睡眠調(diào)節(jié)的差異。
　　方法：

2、r>　　1、選擇10周齡雄性SD大鼠24只。分別進行24小時、48小時、72小時REM睡眠剝奪。
　　2、采用曠場實驗檢測動物潛伏期、水平分數(shù)、直立次數(shù)。驗證睡眠剝奪體力和精神疲勞模型。
　　3、每組取大鼠海馬、下丘腦、紋狀體三個腦區(qū)腦組織，利用RT-PCR技術(shù)分別檢測5羥色胺1A受體和多巴胺D1R、D2R基因的表達情況。
　　4、應用SPSS11.5統(tǒng)計軟件對實驗數(shù)據(jù)進行相應的統(tǒng)計與處理。計量資料進行統(tǒng)計分析選用均數(shù)

3、±標準差((x)±s)。兩組間均數(shù)進行對比與分析采用獨立樣本t驗;多組間均數(shù)進行比較采用單因素方差分析，進行兩兩比較采用LSD檢驗，進行相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)，P＜0.05表示統(tǒng)計結(jié)果的差異具有顯著性。
　　結(jié)果：
　　1、SD大鼠經(jīng)過睡眠剝奪后進行曠場實驗，水平得分及垂直得分均有很大的波動，大鼠對環(huán)境的認知能力明顯下降，體力、精神疲勞。說明睡眠剝奪對機體的精神活動產(chǎn)生抑制。
　　2、睡眠剝奪影響了大鼠海馬(

4、F=56.203，P=0.000)和紋狀體（F=77.288，P=0.000）區(qū)域5-HT1A的基因表達，差異具有統(tǒng)計學意義，在海馬和紋狀體區(qū)域各睡眠剝奪組大鼠的表達量均高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，在海馬剝奪72小時組高于剝奪24小時(P=0.005)和48小時(P=0.010)組，紋狀體區(qū)域則各組動物的差異均具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。各組大鼠下丘腦區(qū)域5-HT1A的基因表達差異不具有統(tǒng)計學意義(P＞0.05)

5、。
　　3、睡眠剝奪影響了大鼠海馬(F=74.708，P=0.000)、紋狀體(F=80.687，P=0.000)區(qū)域D2基因的表達，差異具有統(tǒng)計學意義，各睡眠剝奪組大鼠在海馬和紋狀體區(qū)域的表達量均低于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，剝奪時間長的動物基因表達量也更低，海馬與紋狀體腦區(qū)基因表達量各組動物的差異均具有統(tǒng)計學意義（P均＜0.05）。各組大鼠下丘腦區(qū)域D2R的基因表達表達差異不具有統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。<

6、br>　　4、相關(guān)分析顯示對照組各腦區(qū)5-HT1A和D2R基因的表達不存在相關(guān)性，睡眠剝奪24小時在海馬(r=-0.868，P=0.025)、紋狀體(r=-0.883，P=.02)、下丘腦(r=-0.841,P=0.036)兩個基因的表達均呈負相關(guān)，睡眠剝奪48小時和72小時在海馬(r=-0.881，P=0.02; r=-0.878, P=0.021)、紋狀體(r=-0.735，P=0.006; r=-0.855, P=0.03)兩個基