VEGF和COX-2在惡性血液病中的表達及意義.pdf

1、目的：血管新生與惡性血液病的發(fā)生發(fā)展有密切的關系。VEGF和COX-2是血管新生的重要因子，也與惡性血液病發(fā)生發(fā)展密切相關。本研究重點探討VEGF和COX-2mRNA在惡性血液病患者中表達的相關性以及COX-2抑制劑對VEGF和COX-2蛋白表達水平的影響。 方法：采集96例成人惡性血液病患者和20例正常對照的骨髓及外周血單個核細胞，應用實時定量PCR方法檢測VEGF、COX-2的mRNA水平，并按疾病類型分組分析其臨床意義。應

2、用流式細胞術(FCM)檢測不同濃度COX-2抑制劑干預U937細胞株前后不同時間點VEGF和COX-2蛋白的表達水平。 結(jié)果： 1.各組中VEGF mRNA表達的情況VEGF在急性白血病(AL)中的表達：AL患者VEGFmRNA表達水平為0.67±0.23，高于正常表達水平0.12±0.21，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；其中初治急性髓系白血病(AML)患者VEGF表達水平為0.77±0.27，與正常對照比較，差異有

3、統(tǒng)計學意義(P<0.05)，M2、M4和M5組表達水平分別為0.68±0.16、0.79±0.32和0.75±0.25，M3表達水平為0.76±0.21。ALL患者VEGF表達水平為0.22±0.61，與正常對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。復發(fā)組AL患者VEGF表達水平為0.71±0.25，與正常對照比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，緩解組AL患者VEGF表達水平為0.22±0.63，與正常對照比較，差異無統(tǒng)計學意義

4、(P>0.05)，初治組AL與復發(fā)組AL無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。 38例初治AL患者經(jīng)治療后緩解率為81.6％(31/38)。按照VEGF mRNA平均表達水平0.67±0.23將38例初治AL患者分為兩組。VEGF mRNA低于平均表達水平的初治AL患者緩解率為95.4％(21/22)；VEGF mRNA高于平均表達水平的初治AL患者緩解率為43.7％(7/16)。兩組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。按照COX-2 mR

5、NA平均表達水平0.72±0.61將38例初治AL患者分為兩組。COX-2 mRNA低于平均表達水平的初治AL患者緩解率為92％(23/25)；COX-2 mRNA高于平均表達水平的初治AL患者緩解率為41.7％(5/12)。兩組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。共同表達VEGF mRNA和COX-2 mRNA的初治AL患者緩解率為26.3％(5/19)。 VEGF mRNA在多發(fā)性骨髓瘤中表達情況：初治多發(fā)性骨髓瘤(MM

6、)患者VEGF mRNA表達水平為0.84±0.11，與正常對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。緩解MM患者VEGF表達水平為0.77±0.09，與正常對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。初治組與緩解組相比較無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。 VEGF mRNA在高危骨髓增生異常綜和征(MDS)中表達情況：高危MDS患者VEGF表達水平為0.49±0.54，與正常對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。高危M

7、DS患者與初治AL比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 VEGF mRNA在各期慢性粒細胞白血病(CML)中表達情況：慢性期CML患者VEGF表達水平為0.43±0.42，與正常對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)急變期患者VEGF表達水平為0.66±0.31，與正常對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。慢性期CML患者與急變期CML患者比較，有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。急變期CML患者與初治AL比較，差異

8、無統(tǒng)計學意義(P>0.05) 2.各組中COX-2 mRNA表達的情況AL患者COX-2 mRNA表達水平為0.72±0.61，高于正常表達水平0.24±0.34，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；其中初治AML患者COX-2表達水平為0.77±0.37，與正常對照比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，M4和M5組表達水平分別為0.80±0.22和0.74±0.62，M2和M3組表達水平分別為0.72±0.45和0.79±0.32。A

9、LL患者COX-2表達水平為0.68±0.41，與正常對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。復發(fā)組AL患者COX-2表達水平為0.76±0.59，與正常對照比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，緩解組AL患者COX-2表達水平為0.31±0.24，與正常對照比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，初治組AL與復發(fā)組AL比較有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。 COX-2 mRNA在MM中表達情況：初治MM患者COX-2表達水

10、平為0.67±0.72，與正常對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；緩解MM患者COX-2表達水平為0.45±0.32，與正常對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 COX-2 mRNA在高危MDS中表達情況：高危MDS患者COX-2表達水平為0.73±0.52，與正常對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P<0.05)。高危MDS患者COX-2 mRNA與初治AL比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。慢性期CML患者

11、COX-2表達水平為0.55±0.57，與正常對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。急變患者COX-2表達水平為0.81±0.12，與正常對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。慢性期CML患者與急變期CML患者比較，有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。急變期CML患者與初治AL比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)3.各組中VEGF和COX-2 mRNA表達的相關性AL組中有10例M3，其中9例表達VEGF、7例表達COX-2

12、，在共同表達兩基因的6例中，VEGF mRNA表達與COX-2 mRNA表達呈正相關。M4 7例，其中6例表達VEGF、6例表達COX-2，在共同表達兩基因的6例中，VEGF mRNA的表達與COX-2 mRNA表達呈正相關。M5 5例，其中5例表達VEGF、5例表達COX-2，在共同表達兩基因的4例中，VEGF mRNA的表達與COX-2 mRNA表達呈正相關。 8例MM患者中，5例表達VEGF，7例表達COX-2，在共同表達

13、兩基因的3例中，VEGF mRNA的表達與COX-2mRNA表達無相關性。 8例高危MDS患者中，7例表達VEGF、3例表達COX-2，在共同表達兩基因的3例中，VEGF mRNA的表達與COX-2mRNA表達無相關性。 10例慢性期CML中9例表達VEGF、5例表達COX-2，在共同表達兩基因的5例中，VEGF mRNA的表達與COX-2mRNA表達呈正相關。 4.應用COX-2抑制劑Ⅲ對U937細胞株進行干預

14、的結(jié)果空白組COX-2的表達率為99.2±0.5％。給藥6小時后，5umol/l組COX-2的表達率為94.7±7.22％；10u mol/l組COX-2的表達率為81.5±7.13％；50u mol/l組COX-2的表達率為71.7±6.28％。與空白對照組相比，10u mol/l組以及50u mol/l組COX-2表達降低，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)?？瞻捉MVEGF表達率為99.6±0.4％；5u mol/l組VEGF表達率

15、為97.5±5.2％；10u mol/l組VEGF的表達率為96.7±2.47％；50u mol/l組VEGF的表達率為83.5±7.23％。與空白對照組相比，50u mol/l組VEGF表達下降，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。給藥12小時后，5u mol/l組COX-2的表達率為89.4±5.22％；10u mol/l組COX-2的表達率為74.7±2.55％；50u mol/l組COX-2的表達率為67.8±5.32％。與空白

16、對照組相比，5u mol/l組、10u mol/l組以及50u mol/l組COX-2表達下降，差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。5umol/l組VEGF表達率為92.4±4.51％；10u mol/l組VEGF表達率為80.2±3.82％；50u mol/l組VEGF表達率為66.7±1.91％。與空白對照組相比，10u mol/l和50u mol/l組VEGF表達下降，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 給藥24小時后

17、，5u mol/l組COX-2表達率為77.5±2.85％；10u mold組COX-2表達率為58.4±7.25％；50u mol/l組COX-2表達率為43.5±2.38％。與空白對照組相比，5u mol/l組、10u mol/l組以及50u mol/l組COX-2表達下降，差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。5u mol/l組VEGF表達率為90.2±6.87％；10u mol/l組VEGF表達率為72.9±5.81％；50u