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文檔簡介
1、目的:研究大黃五個藥對即大黃枳實(shí)、大黃黃連、大黃牡丹、大黃桃仁、大黃甘遂配伍后,其抗炎、抗血栓及瀉下利水功效的藥理藥效實(shí)驗(yàn);測定大黃配伍藥對蒽醌類成分含量變化;并進(jìn)行五個藥對的血清藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn),建立大黃五個藥對血清蒽醌成分HPLC分析方法;考察大黃配伍對血清中蒽醌類成分的變化影響;從大黃不同組方的三種功效角度研究和探討大黃藥對配伍機(jī)制及其共性關(guān)系,揭示配伍功效變化的藥效物質(zhì)基礎(chǔ),同時為中藥配伍研究提供新的思路與方向。
方法:采
2、用急性毒性試驗(yàn)法對大黃及大黃五個藥對進(jìn)行毒性比較研究;采用角叉菜膠致小鼠足腫脹造模法研究其抗炎作用;建立鹽酸腎上腺素及冰浴致大鼠急性血瘀模型觀察大黃五個藥對對大鼠凝血四項(xiàng)及血栓因子含量變化的影響;復(fù)制鹽水負(fù)荷模型、模擬水鈉儲溜狀態(tài)觀察正常大鼠和甘油致腎衰大鼠的利尿作用;分光光度法測定大黃五個藥對配伍后總蒽醌與游離蒽醌含量變化并用紫外譜線組圖譜分析大黃五個藥對水提液經(jīng)環(huán)己烷、氯仿及正丁醇三種有機(jī)溶劑萃取后萃取液總蒽醌類成分的紫外吸收譜圖變
3、化;HPLC法以 Thermo Syncronis C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流動相:乙腈-0.1%磷酸水(45:50),進(jìn)樣量5μL,流速1.0mL/min,檢測波長:254nm,柱溫:30℃的條件下,檢測大黃五個藥對血清藥物化學(xué)各蒽醌成分含量,并分析其變化規(guī)律。
結(jié)果:
1.急性毒性試驗(yàn)中各組小鼠無法作出LD50,測得最大給藥量值按含生藥量計(jì)算大黃、大黃枳實(shí)、大黃黃連、大黃牡丹、大黃桃仁及大黃甘
4、遂小鼠灌胃最大耐受量分別為145.33g/kg、142.30g/kg、117.53g/kg、103.45g/kg、113.09g/kg、182.36g/kg,相當(dāng)于人臨床日用量的581、569、470、418、452及729倍;
2.大黃及大黃五個藥對提取物高低劑量(30,15g/kg)能抑制角叉菜膠引起的小鼠足腫脹炎癥反應(yīng),并可降低小鼠炎性組織丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量,提高其超氧化物歧化酶(SOD)活力(P<0
5、.05);
3.大黃及大黃五個藥對給藥組能明顯改善血瘀大鼠的血液流變及凝血功能,PT和APTT顯著降低,TT和FIB顯著升高;同時,給藥組顯著降低血瘀大鼠血漿中 TBX2水平,顯著降低TBX2/6-keto-PGF1α比值,降低VWF和GMP-140含量;
4.正常大鼠水負(fù)荷排尿量在4h內(nèi)有所增加,同時促進(jìn)Na+、K+、Cl-的排泄;甘油致大鼠急性腎衰可使腎小管發(fā)生病變,對Na+重吸收能力下降,導(dǎo)致腎排鈉明顯升高;同
6、時體內(nèi)蛋白質(zhì)分解代謝增強(qiáng),而代謝產(chǎn)物無法從腎臟充分排出,導(dǎo)致尿素氮、尿總蛋白和尿肌酐等非蛋白含氮物質(zhì)含量升高;
5.大黃各藥對配伍后總蒽醌與游離蒽醌總含量均有不同程度的改變,大黃桃仁組游離蒽醌提取率與大黃甘遂組總蒽醌及結(jié)合蒽醌提取率均升高,其余各組均使蒽醌類成分含量降低,其中降幅最大的是大黃黃連組;
6.大黃及大黃五個藥對含藥血清中,可檢測到的蒽醌類成分有蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素,且其在各藥對含藥血清中含量變化有一
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