玉屏風血清藥物化學的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、中藥是中國的傳統(tǒng)藥物,有上千年的應用歷史,中醫(yī)藥在長期的醫(yī)療實踐中逐漸形成了自己一套獨特的理論體系,是中國傳統(tǒng)文化和世界傳統(tǒng)醫(yī)學的精華。長期以來,我國在中藥研究方面缺乏創(chuàng)新,藥效不穩(wěn)定、毒性不清楚、藥效物質基礎不明確、藥物作用機理不清、缺少與國際接軌的質量標準等問題,在很大程度上限制了中藥在臨床上的廣泛使用,降低了中藥在在國際市場上的競爭力?,F(xiàn)代中藥應是成分明確,質量可控,機制基本清楚,安全有效。近年來隨著醫(yī)藥市場競爭加劇和我國加入WT

2、O,“中藥現(xiàn)代化”熱潮方興未艾,探討中藥藥效物質基礎、科學的控制中藥的質量已成為當今醫(yī)藥界研究的熱點和焦點。
   中藥血清藥物化學是“以藥物化學的研究手段和方法為基礎,多種現(xiàn)代技術綜合運用,分析鑒定中藥口服后血清中移行成分,研究其藥效相關性,確定中藥藥效物質基礎并研究其體內過程的應用學科”。中藥血清藥物化學自誕生以來就顯示出了其蓬勃的生機,取得許多卓越的成績,有力地推動了中醫(yī)藥現(xiàn)代的腳步。運用現(xiàn)代分析手段,建立給藥樣品的全成分

3、指紋圖譜,明確給藥樣品中所含原型成分,測定主要成分的含量,確認血中移行成分。這是血清藥物化學研究的重要內容之一。
   中藥指紋圖譜可以有效全面地控制中藥質量,推動中藥現(xiàn)代化進程,可以使有上千年應用歷史的中藥被世界醫(yī)學界所接受。中藥指紋圖譜的應用是中藥質量標準的一個飛躍,實現(xiàn)全過程監(jiān)控中藥及其制劑的生產,對中藥新藥的概念有了新的突破性認識,保證藥品安全有效。
   目前,有關中藥色譜指紋圖譜的建立、分析、評價大多采用色譜

4、技術參數(shù),常規(guī)HPLC檢測方法所獲得的圖譜信息量少,定性能力較弱,在缺少對照品的情況下,較難獲得關于中藥復方中藥效物質基礎的比較全面和確切的信息。
   高效液相色譜-質譜聯(lián)用技術,是把高效液相色譜法的應用范圍廣、分離效能高的優(yōu)勢與質譜的高選擇性、高靈敏度的檢測能力相結合,是復雜體系分離分析最有力的研究手段。在中藥復方的分析中引入質譜技術,可獲得豐富的結構信息,可在沒有標準品的情況下對物質進行定性鑒定;HPLC-MS的靈敏度極高

5、,對體內微量物質的定性定量分析非常有利;對于中藥復方和體內藥效物質基礎這樣復雜體系的研究,HPLC-MS有其獨特的優(yōu)勢。
   玉屏風散由黃芪、白術、防風組成,是中醫(yī)扶正固本的經典方劑,該方藥味簡單,配伍精當,具有益氣固表止汗之功,主治氣虛表弱,易感風寒。經數(shù)千年臨床應用,療效卓越。該方制劑各版中國藥典均予收載。
   目前,對于玉屏風散全方的研究多集中在其藥理藥效研究,對于玉屏風散的化學研究,集中在方中各單味藥的化學成

6、分的研究,各單味藥化學成分研究比較成熟。而對于玉屏風散全方的化學研究,只局限在對其中某個有效成分的測定和質量標準的研究。有關應用HPLC-MS聯(lián)用技術對玉屏風全方的血清中移行成分的檢測未見文獻報道。研究玉屏風散的血清藥物化學,對于揭示玉屏風散藥效物質基礎,闡明其配伍的科學內涵具有重要的意義。
   研究目的:建立玉屏風主要成分的含量測定方法,建立玉屏風水煎液的HPLC-MS指紋圖譜,對照玉屏風水煎液的HPLC-MS指紋圖譜,檢測

7、大鼠中玉屏風含藥血清中移行成分,并對血中移行成分進行鑒定。
   研究方法:應用反相高效液相色譜法測定玉屏風主要成分。制備玉屏風各單味藥材及全方灌胃藥液,選擇SD大鼠作為實驗動物,灌胃給藥,制備含藥血清,應用HPLC-MS聯(lián)用技術測定玉屏風各單味藥材及全方灌胃藥液與含藥血清的總離子流圖,將體內成分譜與體外成分譜對比,比對二者在相同保留時間處色譜峰的質譜圖,檢測血清中的移行成分,并與對照品的質譜圖進行對比,鑒定部分入血成分。

8、>   研究結果:建立了同時檢測玉屏風水煎液中升麻苷、升麻素、5-O-甲基維斯阿米醇苷、槲皮素、亥茅酚苷、芒柄花素等六種有效成分的定量分析方法;建立了玉屏風水煎液的HPLC-MS指紋圖譜,標定了12個共有指紋峰,對其進行了藥材歸屬,并鑒定了6個成分;對照玉屏風水煎液的HPLC-MS指紋圖譜,研究了玉屏風散體內成分譜,結果在玉屏風含藥血清中檢測到7個移行成分,鑒定了其中6個成分:升麻苷、升麻素、5-O-甲基維斯阿米醇苷、亥茅酚苷、黃芪甲

9、苷、芒柄花素。并推斷以上6個成分是玉屏風的藥效物質。
   本課題的創(chuàng)新之處:首次建立了玉屏風的HPLC-MS指紋圖譜,并對其各共有指紋峰進行了藥材歸屬;首次應用HPLC-MS研究了中藥經典方劑玉屏風的血清藥物化學,檢測到玉屏風含藥血清中7個移行成分,鑒定了其中6個入血成分,并推斷這6個成分為玉屏風的藥效物質。
   本課題研究為進一步開展玉屏風散的血清藥物化學研究,積累了大量的實驗數(shù)據,提供了相關的實驗方法。對于揭示玉

10、屏風散藥效物質基礎,闡明其配伍的科學內涵具有重要的意義。
   實驗結果表明,應用HPLC-MS聯(lián)用技術,建立玉屏風水煎液的HPLC-MS指紋圖譜,比HPLC-DAD指紋圖譜更精確,更便于比對確認。利用相關質譜圖,可獲得大量的化學結構相關信息,可避免DAD檢測器色譜峰可能帶來的“偽證”。HPLC-MS技術靈敏度高,適用于血清中微量藥效物質基礎的研究。開展HPLC-MS聯(lián)用技術的應用研究,有助于玉屏風指紋圖譜的建立與完善,為玉屏風

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