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1、目的:通過(guò)建立大承氣湯水煎劑及大鼠口服給藥后血清的HPLC-DAD指紋圖譜色譜分析方法,對(duì)大承氣湯的血清藥物化學(xué)方法進(jìn)行研究,初步闡明大承氣湯血中移行成分的來(lái)源,在一定程度上闡明大承氣湯復(fù)方的配伍規(guī)律及藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。
方法:首先,建立大承氣湯水煎劑及其拆方的HPLC-DAD指紋圖譜方法,用來(lái)描述其主要化學(xué)成分的信息,確保給藥樣品質(zhì)量的穩(wěn)定性。其次,利用所建立的指紋圖譜分析方法,對(duì)口服大承氣湯水煎劑及其拆方后的大鼠全血進(jìn)行血
2、中移行成分分析。摸索血清樣品制備方法,建立大承氣湯的血中移行成分指紋圖譜。分析比較該復(fù)方體內(nèi)、體外兩種色譜指紋圖譜,確定大鼠血中移行成分的來(lái)源,繼而比較大承氣湯、大承氣湯缺芒硝、方中兩藥配伍及單味藥的指紋圖譜,確定血中各種移行成分的來(lái)源,闡明復(fù)方配伍規(guī)律。最后,根據(jù)血清移行成分的特點(diǎn),選擇性的對(duì)血清中某固定的特征性入血成分進(jìn)行研究,找到給藥后不同時(shí)間點(diǎn)該成分的代謝特點(diǎn)。
結(jié)果:大承氣湯復(fù)方體外可以明確標(biāo)出的成分有58個(gè),而
3、其血中移行成分有37個(gè),其中29個(gè)成分來(lái)源于復(fù)方中的原型成分,另外的8個(gè)為代謝物和新產(chǎn)生的物質(zhì)。單味藥大黃有入血成分25個(gè),厚樸入血成分10個(gè),枳實(shí)入血成分15個(gè),主要入血成分在君藥大黃中,佐證了大黃作為君藥在復(fù)方中的作用。大黃厚樸配伍后主要入血成分共有26個(gè),其中有15個(gè)成分來(lái)源于大黃,有2個(gè)成分來(lái)源于厚樸,有5個(gè)在單味藥大黃和厚樸中都可以檢測(cè)到,大黃、厚樸各有4個(gè)成分消失,另有4個(gè)為新產(chǎn)生的成分。大黃枳實(shí)配伍后主要入血成分共有27個(gè)
4、,其中有9個(gè)成分來(lái)源于大黃,5個(gè)來(lái)源于枳實(shí),有6個(gè)成分在單味藥大黃和枳實(shí)中都可以檢測(cè)到,大黃中有8個(gè)成分消失,枳實(shí)中有2個(gè)成分消失,另有5個(gè)為新產(chǎn)生的成分。厚樸枳實(shí)配伍后主要入血成分共有24個(gè),其中有2個(gè)成分來(lái)源于厚樸,7個(gè)來(lái)源于枳實(shí),有8個(gè)在單味藥厚樸和枳實(shí)中都可以檢測(cè)到,另有7個(gè)為新產(chǎn)生的成分。眼球取血時(shí)檢測(cè)血清中某固定的特征性成分,不同給藥方法下的體內(nèi)分布水平變化規(guī)律基本一致,均隨著給藥時(shí)間的延長(zhǎng),色譜峰峰面積呈現(xiàn)先升高再降低的特
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