孤核受體TR-4介導(dǎo)線粒體途徑在DEHP誘導(dǎo)GC-2spd細(xì)胞凋亡中作用.pdf

1、目的:本研究以DEHP為受試物，以GC-2spd細(xì)胞為研究對(duì)象，研究孤核受體TR4介導(dǎo)線粒體通路在DEHP誘導(dǎo)GC-2spd細(xì)胞凋亡中的作用，揭示DEHP誘導(dǎo)生精細(xì)胞凋亡的機(jī)制。
　　方法:用DMSO溶解DEHP，不同濃度的DEHP染毒GC-2spd細(xì)胞，分為低（50μmol/L）、中(100μmol/L)、高（200μmol/L）三個(gè)劑量組。1、采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)GC-2spd細(xì)胞凋亡情況。2、采用Real-time PCR檢測(cè)

2、細(xì)胞Bcl-2、Bax、Cyt-C、caspase-9、caspase-3等mRNA的表達(dá)水平。3、Western Blot檢測(cè)細(xì)胞TR4、Bcl-2、Bax、Cyt-C、procaspase-9、procaspase-3等蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果:1.GC-2 spd細(xì)胞凋亡的變化情況:中、高劑量組細(xì)胞凋亡率明顯高于對(duì)照組（P＜0.05），但低劑量組與對(duì)照組比較差異不明顯。2.各染毒組Bax、Cyt-Ccaspase-9、cas

3、pase-3 mRNA表達(dá)水平均升高，其中低、高劑量染毒組的Bax和caspase-9與中、高劑量染毒組的Cyt-C，中劑量組的caspase-3與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)，Bcl-2 mRNA表達(dá)水平下降，并且所有染毒組的Bcl-2與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。3.各染毒組TR4、Bcl-2、procaspase-3、procaspase-9蛋白表達(dá)水平均降低，Bax和Cyt-C蛋白表達(dá)水平升高，其中