線粒體在活性氧誘導腸上皮細胞凋亡中的作用.pdf

1、首先,應用過氧化氫處理腸上皮細胞系SW-480細胞建立活性氧誘導腸上皮細胞凋亡的體外模型.結(jié)果顯示,過氧化氫處理特別是濃度為4mmol/L時:(1)腸上皮細胞出現(xiàn)細胞變小變圓、細胞核染色質(zhì)凝集、核固縮及凋亡小體樣等典型凋亡樣形態(tài)學改變;(2)線粒體出現(xiàn)腫脹、內(nèi)嵴減少或消失、基質(zhì)透明呈氣球樣等超微結(jié)構(gòu)改變;(3)與結(jié)構(gòu)變化一致,腸上皮細胞凋亡明顯增加,并伴有細胞線粒體呼吸功能明顯受抑.以上結(jié)果表明活性氧可誘導腸上皮細胞凋亡,線粒體結(jié)構(gòu)和功

2、能的改變與細胞凋亡密切相關(guān).其次,在該模型的基礎(chǔ)上,觀察了4mmol/L及400μmol/L兩種濃度過氧化氫對線粒體相關(guān)分子Bcl-2及Bax表達、ERK-1、凋亡分子細胞色素C及AIF以及線粒體膜電位、線粒體轉(zhuǎn)位的影響,初步探討線粒體與活性氧誘導腸上皮細胞凋亡的關(guān)系.結(jié)果顯示,過氧化氫處理后:(1)腸上皮細胞Bcl-2蛋白表達明顯減弱,與Bcl-2蛋白表達的趨勢相反,Bax蛋白表達明顯增加,相對于Bcl-2及Bax單獨的變化,Bcl-

3、2與Bax比例下降更加明顯;(2)腸上皮細胞ERK-1蛋白表達明顯減弱;(3)腸上皮細胞AIFmRNA表達明顯增加及細胞色素C釋放明顯增加;(4)腸上皮細胞線粒體分布從一種分散、兩極化或者近乎對稱的分布轉(zhuǎn)為一種不對稱呈串樣的分布,并出現(xiàn)塊狀線粒體聚集;(5)腸上皮細胞線粒體膜電位明顯下降.結(jié)果表明:線粒體與活性氧所致腸上皮細胞凋亡關(guān)系密切,Bcl2家族特性改變及線粒體膜通透性轉(zhuǎn)變所致凋亡分子的釋放是活性氧所致腸上皮細胞凋亡的重要分子基礎(chǔ)