轉(zhuǎn)EPSPS-G6基因棉花種質(zhì)系雄配子對草甘膦敏感性及其在雜交棉制種中的應用.pdf

1、本研究以轉(zhuǎn)基因的抗草甘膦棉花種質(zhì)系為材料，探究轉(zhuǎn)基因抗草甘膦棉花植株現(xiàn)蕾后噴施不同濃度草甘膦對花器官形態(tài)結(jié)構(gòu)和配子育性的影響。結(jié)果表明，草甘膦處理對轉(zhuǎn)EPSPS-G6基因棉花種質(zhì)系植株的生長發(fā)育無明顯影響。然而，棉花現(xiàn)蕾以后，草甘膦處理卻能導致轉(zhuǎn)基因抗草甘膦棉花種質(zhì)系花冠變小，花絲變短，柱頭變長，花藥皺縮、不能開裂，呈雄性敗育的特征，尤其是高濃度草甘膦處理?；ǚ哿Ｓ澡b定及不同間隔時間噴施草甘膦的試驗結(jié)果表明，間隔20 d噴一次草甘膦，

2、即在首次噴藥20 d后保持完全不育。考慮到氣候等因素，轉(zhuǎn)基因抗草甘膦棉花可在現(xiàn)蕾初期噴施20 mM的草甘膦，每隔15d（遇特殊氣候可延5d）噴1次，共噴4次，即可進行不去雄雜交棉制種。
　　 通過固體組織材料石蠟切片技術比較20 mM濃度誘導的雄性不育小孢子發(fā)育與對照和質(zhì)核互作雄性不育系小孢子發(fā)育的差異。發(fā)現(xiàn)質(zhì)核互作雄性不育系在小孢子母細胞初期開始出現(xiàn)敗育，敗育時間早，小孢子母細胞降解和絨粘層發(fā)育障礙是導致該材料不產(chǎn)生花粉的兩個

3、主要原因;草甘膦誘導的雄性不育小孢子敗育的時間比較晚，表現(xiàn)為小孢子母細胞敗育、出現(xiàn)三分體、四分體畸形、藥室穿孔等現(xiàn)象且不育個體間的表現(xiàn)有一定的差異。
　　 為探究草甘膦誘導該種質(zhì)系雄性不育的分子機理，采用RT-PCR技術分析了EPSPS-G6基因在20 mM處理第20 d當天葉片、花萼、花冠、雄蕊和雌蕊中的表達情況。結(jié)果表明與CK相比，葉片、花萼、花冠中EPSPS-G6基因表達量與CK相近，雄蕊和雌蕊的表達分別增加到1.89和1