哮喘小鼠血清IL-17與IgE的變化及相關性分析.pdf

1、目的：1．建立OVA致敏和激發(fā)的哮喘小鼠模型；2．觀察支氣管哮喘急性期、慢性期及緩解期小鼠與正常小鼠血清IL-17和IgE的水平變化；3．觀察支氣管哮喘急性期、慢性期及緩解期小鼠與正常小鼠肺泡灌洗液中細胞分類及肺組織病理學的變化：4．探討IL-17與IgE在支氣管哮喘免疫學發(fā)病機制中的作用及相關性。
　　 方法：4~6周齡、18~22g健康清潔級雌性昆明小鼠40只，隨機分為急性哮喘組A1組(10只)、慢性哮喘組A2組（10只）、

2、哮喘緩解組A3組（10只）和對照組C組(10只)，以雞卵清蛋白(OVA)致敏和激發(fā)的方法建立哮喘模型：A1組、A2組和A3組在實驗第0、7、14天予20μgOVA+150μlAI(OH)3+50μlNS(100mg/L)混懸液腹腔注射致敏；第28、29、30天將A1組、A2組和A3組每只小鼠單獨置于5L密閉容器中，以2％OVA霧化吸入激發(fā)，使小鼠暴露在OVA氣霧中20~30min直至出現(xiàn)哮喘樣發(fā)作為止；A1組在第30天霧化的24小時后處

3、死；A2組在第31~69天每天予2%OVA霧化吸入;A3組30天后不予任何處理；C組予等量生理鹽水腹腔注射及霧化吸入，處置時間與A2組相同；第70天處死A2組、A3組及C組。眼球取血約1.5ml后，頸椎脫位處死，血液離心，取上層血清，分別用酶聯(lián)免疫法檢測白介素-17(IL-17)及IgE;支氣管肺泡灌洗液(BLAF)進行細胞分類計數(shù);取肺組織病理切片HE染色觀察炎性細胞浸潤。所得實驗數(shù)據(jù)均采用SPSS18.0軟件進行分析。
　　

4、 結果：1．哮喘小鼠模型成功建立的表現(xiàn)及比較：A1組、A2組及A3組小鼠均出現(xiàn)煩躁不安，呼吸急促，擦鼻，打噴嚏，口唇尾部紫紺，活動頻繁，毛發(fā)豎起失去光澤，腹肌痙攣，大小便失禁等表現(xiàn)；A2組表現(xiàn)的尤其顯著，更易驚，嚴重者呼吸節(jié)律不齊，俯伏不動，四肢癱軟；A3、組早期較明顯，后期癥狀稍緩解：C組未出現(xiàn)上述癥狀。
　　 2．血清IL-17水平：A1組小鼠為15.14±1.98ng/ml，A2組小鼠為20.63±1.90ng/ml，A3

5、組小鼠為10.96±1.44ng/ml，C組小鼠為0.39±0.46ng/ml；A2組IL-17水平明顯高于A1、A3及C組(P<0.01)，差異有統(tǒng)計學意義；A1組IL-17水平明顯高于A3組及C組(P<0.01)，差異有統(tǒng)計學意義；A3組IL-17水平明顯高于C組(P<0.01)，差異有統(tǒng)計學意義。
　　 3．血清IgE水平：A1組小鼠為6.63+0.78ng/ml，A2組小鼠為6.94+0.12ng/ml，A3組小鼠6.2

6、2-0.15ng/ml，C組小鼠為5.44士0.24ng/ml。A2組IgE水平明顯高于AI、A3及C組(P<0.01)，差異有統(tǒng)計學意義；A1組lgE水平明顯高于A3組及C組(P<0.01)，差異有統(tǒng)計學意義；A3組leE水平明顯高于C組(P<0.Ol)，差異有統(tǒng)計學意義。
　　 4．小鼠BALF中細胞總數(shù)和嗜酸性粒細胞、中性粒細胞所占百分比(EOS%、NE%)- A2組細胞總數(shù)和EOS%、NE%明顯高于A1組、A3組及C組(

7、P<0．Ol)，差異有統(tǒng)計學意義；A1組細胞總數(shù)和EOS%、NE%明顯高于A3組及C組(P<0.01)，差異有統(tǒng)計學意義；A0組細胞總數(shù)和EOS%、NE%明顯高于C組(P<0.01)，差異有統(tǒng)計學意義。
　　 5．血清IL-17與IgE水平呈顯著正相關(r--0.942，P<0.01)，差異有統(tǒng)計學意義；血清IL-17與BALF中EOS%水平呈顯著正相關(r--0.956，P

8、F中NE%水平呈顯著正相關(r=0.938，P<0.01)，差異有統(tǒng)計學意義。
　　 6．肺組織病理學觀察：A1、A2、A3組小鼠與C組小鼠對比顯示肺臟表面腫脹，體積增大，切面可見滲出白色泡沫。肺組織切片HE染色示支氣管管腔狹窄，黏膜水腫，黏液腺增生，黏膜皺襞增多，肺泡隔增厚、水腫形狀不規(guī)則，肺泡腔融合擴大。A1組支氣管黏膜、黏膜下層、平滑肌及血管周圍可見大量炎性細胞浸潤；A3組炎性細胞浸潤稍減少；A2組則在急性期的病理基礎上出

9、現(xiàn)氣道上皮纖維化，出現(xiàn)氣道重塑。C組小鼠氣管及肺泡結構正常，支氣管粘膜上皮完整，未見明顯炎癥細胞。
　　 結論：1．哮喘小鼠模型建立成功，急性期、慢性期及緩解期的病理變化符合哮喘的病理生理改變。
　　 2.IL-17在哮喘的免疫學發(fā)病機制中起促進作用，參與哮喘的急性炎癥反應及氣道重塑過程，并且IL-17的水平能在一定程度上表示哮喘病情的嚴重程度。
　　 3．哮喘小鼠存在免疫功能紊亂，IgE、EOS、NE在急性期升