CXCR1-2拮抗劑G31P對(duì)順鉑誘導(dǎo)荷瘤小鼠腎損傷模型保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的:
　　 順鉑(Cis-diammin-odichloroplatinum，DDP)是細(xì)胞周期非特異性藥物，具有細(xì)胞毒性，可抑制癌細(xì)胞的DNA復(fù)制過程，并損傷其細(xì)胞膜上結(jié)構(gòu)，有較強(qiáng)的廣譜抗癌作用。臨床用于治療卵巢癌、前列腺癌、睪丸癌、肺癌、鼻咽癌、食道癌、甲狀腺癌及成骨肉瘤等多種實(shí)體腫瘤。但同時(shí)存在腎毒性、胃腸道反應(yīng)、耳毒性和神經(jīng)毒性等多種毒副反應(yīng)，盡管順鉑有較強(qiáng)的毒性，但由于良好的治療效果，依然是最常用的化療藥物之一。順鉑

2、高效抗腫瘤效應(yīng)和多種毒副作用（尤其是對(duì)腎的毒性和損傷）呈劑量依賴性。急性腎功能衰竭（acuterenalfailure，ARF）作為順鉑治療最嚴(yán)重的并發(fā)癥[3]，研究其發(fā)病機(jī)制對(duì)于增加順鉑的臨床應(yīng)用劑量，提高其抗腫瘤效應(yīng)是非常重要的。順鉑引起的ARF，與細(xì)胞因子，粘附分子及腎組織中炎癥細(xì)胞如巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞浸潤相關(guān)[3-7]。趨化因子是一類重要的細(xì)胞因子，在炎癥的發(fā)生發(fā)展中具有重要功能。在炎癥早期，中性粒細(xì)胞及單核巨噬細(xì)胞在CXC趨

3、化因子與其受體CXCR1/CXCR2的作用下到達(dá)損傷部位產(chǎn)生免疫應(yīng)答，釋放大量炎癥介質(zhì)，導(dǎo)致?lián)p傷進(jìn)一步加重。本文旨在利用CXCR1/CXCR2拮抗劑-G31P抑制炎癥的過度反應(yīng)，減輕順鉑引起腎損傷，防止損傷的進(jìn)一步加重，為防治順鉑應(yīng)用導(dǎo)致的腎損傷提供新思路。
　　 方法:
　　 昆明鼠，210只，雌性，16-18g，隨機(jī)分為DDP、DDP+G31P、sDDP、G31P、Ca（腫瘤對(duì)照組）、Normal（正常對(duì)照組）六組。

4、(1)小鼠H22實(shí)體瘤模型的建立:DDP、DDP+G31P、sDDP、G31P、Ca組小鼠背部皮下接種H22細(xì)胞懸液，每只106。(2)腎損傷模型建立:接種腫瘤第七天，注射順鉑前半小時(shí)，DDP+G31P、G31P組小鼠背部皮下注射G31P500μg/kg，其余各組注射等體積的生理鹽水，以后隔天注射。半小時(shí)后DDP和DDP+G31P組小鼠，單次腹腔注射順鉑12.5mg/kg;sDDP組，單次腹腔注射順鉑2mg/kg/只;G31P及Ca組小

5、鼠腹腔注射等體積的生理鹽水。(3)采集標(biāo)本:造模后觀察記錄小鼠一般狀態(tài)、體重變化。建立腎損傷模型后4h、8h、12h、24h、48h、72h、21d，每組分別取5只，眼內(nèi)眥靜脈取血，測定血清尿素氮(BUN)和肌酐(SCr);之后處死小鼠，取雙腎測稱重，計(jì)算腎系數(shù);取部分腎組織提取總mRNA，qPCR檢測IL-1β、KC、MIP-2mRNA的表達(dá);剝離實(shí)體腫瘤，稱重，免疫組化檢測VEGF-D;分離腹股溝淋巴結(jié)，HE染色，檢測腫瘤轉(zhuǎn)移情況。

6、
　　 結(jié)果:
　　 (1)血清BUN和SCr:注射DDP后，血清BUN和SCr增高，在48h達(dá)到峰值，大劑量DDP最高分別為10.95mmol/l和67.26μmol/l，G31P與大劑量DDP聯(lián)合應(yīng)用，使血清BUN和SCr顯著降低分別為8.22mmol/l和58.81μmol/l(p＜0.05)，與小劑量的DDP組相似。
　　 (2)腎系數(shù):注射DDP后，腎系數(shù)逐漸增大，大劑量DDP與G31P聯(lián)合應(yīng)用顯著小于

7、大劑量DDP組，在72h差異最明顯，分別為11.13g/kg和13.54g/kg(p＜0.05)，與小劑量DDP組12.02g/kg差異不明顯。
　　 (3)腎臟炎癥因子:大劑量DDP導(dǎo)致腎臟損傷嚴(yán)重，IL-1β、KC、MIP-2mRNA表達(dá)增加，與G31P聯(lián)合應(yīng)用后，明顯降低(p＜0.05)。
　　 (4)腫瘤重量:大劑量DDP明顯抑制腫瘤生長，腫瘤平均1.01g小于小劑量DDP治療組1.448g和G31P治療組1.6

8、7g，大劑量DDP與G31P聯(lián)合應(yīng)用，抑制腫瘤效果更顯著，平均0.575g。同時(shí)，G31P也有一定的抑瘤效果，腫瘤為1.67g，明顯小于腫瘤組2.06g。
　　 (5)腫瘤組織VEFG-D表達(dá)及腫瘤轉(zhuǎn)移:相對(duì)其他各組，大劑量DDP組與大劑量DDP+G31P組，腫瘤組織VEFG-D表達(dá)降低，腹股溝淋巴結(jié)中腫瘤細(xì)胞減少。
　　 結(jié)論:
　　 血清BUN和SCr升高、腎系數(shù)增大、腎臟炎癥因子表達(dá)增多，顯示大劑量順鉑導(dǎo)致

9、荷瘤小鼠腎功能損傷，炎癥細(xì)胞浸潤，產(chǎn)生免疫應(yīng)答的同時(shí)，釋放大量炎癥介質(zhì)。順鉑誘導(dǎo)的腎損傷，產(chǎn)生炎癥，可引起劇烈的二次（多次）損傷波，最終可導(dǎo)致腎功能嚴(yán)重受損。CXCR1/CXCR2拮抗劑-G31P通過與中性粒細(xì)胞等炎癥細(xì)胞競爭結(jié)合CXCR1/CXCR2，抑制炎癥的發(fā)展，減輕順鉑對(duì)腎臟的副作用。與大劑量DDP單獨(dú)應(yīng)用比較，大劑量DDP和G31P聯(lián)合應(yīng)用，抑制腫瘤的效果更顯著，腎毒性也顯著降低，這為臨床提高順鉑應(yīng)用劑量和防治順鉑導(dǎo)致的腎功能