氨基胍和泰能對(duì)大鼠重癥急性胰腺炎細(xì)菌易位的影響.pdf

1、背景和目的：重癥急性胰腺炎(SAP)病情兇險(xiǎn)，發(fā)展迅速，常累及多個(gè)臟器，由于缺乏有效的特異性治療方法，目前并發(fā)癥和病死率仍較高。SAP按病程一般分為急性反應(yīng)期(病程2周以內(nèi))、全身感染期(2周～2個(gè)月及以上)和殘余感染期(晚期并發(fā)癥及后遺癥期，多發(fā)生在2個(gè)月后)。目前綜合治療措施的進(jìn)步使大多數(shù)SAP患者能安全度過急性反應(yīng)期，但進(jìn)入全身感染期后卻常常合并多器官功能不全綜合征(MODS)，成為最主要的死亡原因。據(jù)報(bào)道，SAP并發(fā)胰腺和胰周感

2、染率可高達(dá)40％～70％，由此發(fā)生膿毒癥則病死率可超過20％～50％。因此防治細(xì)菌易位在重癥急性胰腺炎的治療中具有十分重要的作用。目前認(rèn)為感染壞死胰腺和胰周的病原菌主要來源于腸道。Deitch認(rèn)為細(xì)菌易位是腸道遭受三重打擊后發(fā)生的。第一重打擊可能是缺血、缺氧。第二重打擊是腸道血流量的恢復(fù)，伴隨中性粒細(xì)胞遷移到腸道微循環(huán)中，釋放細(xì)胞因子。缺血一再灌注還能損傷腸相關(guān)淋巴樣組織(GALT)和腸上皮細(xì)胞。第三重打擊是腸屏障完整性的丟失，使腸道有

3、毒物質(zhì)和細(xì)菌能透過腸壁。細(xì)菌易位的機(jī)制主要包括：1.腸黏膜物理屏障功能的喪失；2.免疫功能抑制；3.腸動(dòng)力降低；4.腸道菌群失衡。細(xì)菌易位的途徑目前尚不明確，可能是通過淋巴管、血液等途徑易位到腸外組織。SAP時(shí)抑制型一氧化氮合成酶(iNOS)被激活，產(chǎn)生大量的NO，大量的NO通過多種途徑損傷腸道粘膜。如腸道細(xì)胞長(zhǎng)期接觸NO可引起細(xì)胞旁分泌或自分泌功能紊亂；抑制細(xì)胞呼吸；引起局部血流分布不均；導(dǎo)致氧化過亞硝酸鹽生成過多。上述途徑導(dǎo)致腸道損

4、傷，腸道屏障功能紊亂，引起細(xì)菌易位。此外由iNOS產(chǎn)生的NO能夠破壞胰腺微循環(huán)，引起胰腺缺血、壞死。胰腺感染與胰腺壞死的發(fā)生密切相關(guān)。胰腺感染很少發(fā)生在未壞死的組織。抑制iNOS的活性及預(yù)防性的使用抗生素在理論上能有效預(yù)防SAP細(xì)菌易位，因此本實(shí)驗(yàn)通過構(gòu)建SAP動(dòng)物模型，研究選擇性iNOS抑制劑氨基胍和抗生素泰能對(duì)腸外組織細(xì)菌感染的影響，從而探討它們對(duì)細(xì)菌易位的影響及細(xì)菌易位的可能途徑，為SAP臨床治療提供更有力的理論基礎(chǔ)和依據(jù)。

5、 方法：①實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為正常對(duì)照組、SAP組、SAP+氨基胍組、SAP+泰能組和SAP+氨基胍+泰能組；②采用胰腺實(shí)質(zhì)內(nèi)注射?；悄懰徕c的方法制作SAP模型，利用氨基胍和泰能對(duì)模型進(jìn)行干預(yù)，術(shù)后48h時(shí)采集標(biāo)本；③利用血清淀粉酶和光鏡下胰腺組織病理學(xué)的改變對(duì)SAP模型進(jìn)行評(píng)價(jià)；④利用光鏡下腸粘膜的改變對(duì)腸道粘膜損傷進(jìn)行評(píng)估；⑤利用化學(xué)比色法檢測(cè)胰腺組織MPO表達(dá)水平；⑥利用酶學(xué)分光光度法測(cè)定血D-乳酸水平；⑦對(duì)門靜脈血、胰腺、腸系膜淋

6、巴結(jié)、肝臟、腹水進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。 結(jié)果：①利用胰腺實(shí)質(zhì)內(nèi)注射?；悄懰徕c的方法，復(fù)制了SAP大鼠模型，經(jīng)檢測(cè)血清淀粉酶和組織學(xué)觀察證實(shí)模型符合SAP實(shí)驗(yàn)診斷標(biāo)準(zhǔn)；②胰腺組織MPO水平SAP組較正常組顯著升高(P＜0.05)，，SAP+氨基胍組、SAP+泰能組、SAP+氨基胍+泰能組又較SAP組顯著降低(P＜0.05)；③血清D-乳酸水平SAP組和SAP+泰能組較正常組水平顯著升高(P＜0.05)，SAP組和SAP+泰能組血清D-乳酸

7、水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，SAP+氨基胍組和SAP+氨基胍+泰能組較SAP組和SAP+泰能組顯著降低(P＜0.05)；④細(xì)菌培養(yǎng)正常組各臟器培養(yǎng)未見細(xì)菌生長(zhǎng)。SAP組各臟器均培養(yǎng)出細(xì)菌，其中腹水陽性率最高，其次為胰腺，再次為腸系膜淋巴結(jié)(MLN)，肝臟和血液陽性率較低。SAP+氨基胍組、SAP+泰能組、SAP+氨基胍+泰能組各臟器細(xì)菌培養(yǎng)陽性率均較低，但腹水仍最高，其次為胰腺、MLN、肝臟、血液。檢出的細(xì)菌經(jīng)鑒定后均為腸源性細(xì)菌