肝纖維化動物模型的功能磁共振定量研究及部分臨床應(yīng)用.pdf

1、第一部分:
　　 目的:構(gòu)建穩(wěn)定、可靠、肝纖維化實驗動物模型，研究模型肝臟病變的進展情況和常規(guī)影像學(xué)表現(xiàn)，為影像學(xué)功能成像定量評價做準(zhǔn)備。
　　 方法:50只雄性清潔級Sprague-Dawley鼠，30只普通級雄性新西蘭大白兔，隨機分為實驗組（新西蘭大白兔 n=20；SD大鼠n=40）和對照組(新西蘭大白兔 n=10；SD大鼠n=10)。采用CCL4（四氯化碳）腹腔注射法誘導(dǎo)肝纖維化鼠模型，血吸蟲尾蚴腹貼法誘導(dǎo)肝纖維化

2、兔模型。肝纖維化鼠模型在20W時，肝纖維化兔模型在8W、10W、12W分別行MDCT和MRI檢查。以HE染色、Masson三色染色、透射電鏡觀察兩種肝纖維模型肝臟病變，并對其纖維化程度和炎癥進行分級分期。
　　 結(jié)果:肝纖維化兔模型4W時僅肝臟觀察到炎性浸潤，6W時出現(xiàn)急性蟲卵結(jié)節(jié)，8W時觀察到肝纖維化膠原沉積，10W及12W膠原沉積明顯加重。病理學(xué)證實兩種肝纖維化模型成功建立，兩種模型纖維化程度相似，但是炎癥評分肝纖維化鼠明顯

3、高于肝纖維化兔，具有統(tǒng)計學(xué)意義。肝纖維化鼠鏡下脂肪變較肝纖維化兔明顯。MDCT和MRI掃描可以顯示兩種肝纖維化模型肝體積縮小、腹水等間接征象。MDCT后處理重建計算肝臟體積，兩種模型組體積小于對照組，并具有統(tǒng)計學(xué)差異。肝纖維化兔模型MRI掃描多次觀察發(fā)現(xiàn)門脈分支擴張、門脈壓力增高表現(xiàn)，并隨時間而進展加重。
　　 結(jié)論:結(jié)合兩種肝纖維化模型，有助于了解復(fù)雜的人類自然病程。MDCT和MRI掃描可以觀察到肝纖維化模型肝體積縮小、腹水、

4、門脈壓力增高等間接表現(xiàn)，但無法提供定量評價指標(biāo)。
　　 第二部分:
　　 目的:兩種肝纖維模型行DTI掃描并與病理分級行相關(guān)分析，初步探討了DTI在肝纖維化定量研究的可行性及應(yīng)用價值。
　　 方法:CCl4誘導(dǎo)肝纖維化SD大鼠模型10只，同期對照5只及血吸蟲腹貼法誘導(dǎo)新西蘭大白兔肝纖維化模型18只，同期對照10只。肝纖維化鼠模型在造模后20W及斷頭處死后4h內(nèi)離體肝組織，肝纖維化兔模型在造模后8W、10W、12W

5、分別行DTI掃描（EPI，TR/TE=1600/68.1， 6個方向，b=500s/mm2），完成掃描后以HE染色、Masson三色染色、透射電鏡觀察兩種肝纖維模型肝臟病變，并對其纖維化程度和炎癥進行分級分期。掃描圖像經(jīng)AW4.2工作站處理，計算并分析肝纖維化鼠模型和對照的在體和離體ADC值和各向異性值（FA），肝纖維化兔模型各個時期的ADC值和各向異性值（FA），并與病理分級行相關(guān)性分析，采用SSPS13.0進行統(tǒng)計分析，顯著水平取0

6、.05。
　　 結(jié)果:病理學(xué)證實兩種肝纖維化模型均發(fā)生肝纖維化改變，兩種模型纖維化程度分布相似，但是炎癥評分肝纖維化鼠明顯高于肝纖維化兔，具有統(tǒng)計學(xué)意義，肝纖維化鼠鏡下脂肪變較肝纖維化兔明顯。兩種肝纖維化模型中ADC值和FA值改變一致，均表現(xiàn)為ADC值較對照組降低，F(xiàn)A值較對照組升高。具有統(tǒng)計學(xué)意義指標(biāo)為肝纖維化鼠在體ADC值，肝纖維化兔ADC值。肝纖維化兔模型ADC值隨著模型時間進展而減低，并且不同病理分級之間差別具有統(tǒng)計學(xué)意

7、義。兩種肝纖維化模型ADC值與肝纖維化分級之間存著負(fù)相關(guān)，并具有統(tǒng)計學(xué)意義。（肝纖維化鼠在體ADC r=-0.607 P=0.016；肝纖維化兔，r=-0.765 P=＜0.01）
　　 結(jié)論:兩種肝纖維化模型病理分期與ADC值均有相關(guān)性，ADC值可成為定量評價肝纖維化指標(biāo)。
　　 第三部分:
　　 目的:兩種肝纖維模型行1H-MRS掃描并與病理分級行相關(guān)分析，初步探討了1H-MRS在肝纖維化定量研究的可行性及應(yīng)

8、用價值。
　　 方法:CCl4誘導(dǎo)肝纖維化SD大鼠模型10只，同期對照5只及血吸蟲腹貼法誘導(dǎo)新西蘭大白兔肝纖維化模型18只，同期對照10只。肝纖維化鼠模型在造模后20W，肝纖維化兔模型在造模后8W、10W、12W分別行1H-MRS掃描（PRESS，TR/TE=1500/35，F(xiàn)OV=16×16cm，NEX8，不抑水，時間2分12秒），完成掃描后以HE染色、Masson三色染色、透射電鏡觀察兩種肝纖維模型肝臟病變，并對其纖維化程度

9、和炎癥進行分級分期。掃描圖像經(jīng)sage后處理，分別測量兩種肝纖維化模型糖原和葡萄糖復(fù)合物（Glyu）、膽堿（Cho）、谷氨酰胺和谷氨酸復(fù)合物（Glx）、甘油三酯及其化合物（Lip）、水（Water）的平均峰高，并計算Fat％百分比 [FAT=Lip/（lip+water）×100％]，并與病理分級行相關(guān)性分析，采用SSPS13.0進行統(tǒng)計分析，顯著水平取0.05。
　　 結(jié)果:病理學(xué)證實兩種肝纖維化模型均發(fā)生肝纖維化改變，兩種模

10、型纖維化程度分布相似，但是炎癥評分肝纖維化鼠明顯高于肝纖維化兔，具有統(tǒng)計學(xué)意義，肝纖維化鼠鏡下脂肪變較肝纖維化兔明顯。兩種肝纖維化模型MRS均可以觀察到Cho峰隨著纖維化分期升高表現(xiàn)，Cho峰高在兩種模型中均有統(tǒng)計學(xué)差異，并與肝纖維化分級呈正相關(guān)（肝纖維化鼠 r=0.642，P＜0.01；肝纖維化兔，r=0.643，P＜0.01）。肝纖維化鼠模型Fat高于肝纖維化兔。
　　 結(jié)論:兩種肝纖維化模型病理分期與Cho峰高均有相關(guān)性，

11、Cho峰可成為定量評價肝纖維化指標(biāo)。
　　 第四部分:
　　 目的:兩種肝纖維模型行T2*Map掃描并火焰原子光譜法測定肝鐵含量相對照，并與病理分級行相關(guān)分析，初步探討了T2*Map在肝纖維化定量研究的可行性及應(yīng)用價值。
　　 方法:CCl4誘導(dǎo)肝纖維化SD大鼠模型10只，同期對照5只及血吸蟲腹貼法誘導(dǎo)新西蘭大白兔肝纖維化模型18只，同期對照10只。肝纖維化鼠模型在造模后20W，肝纖維化兔模型在造模后8W、10W

12、、12W分別行T2*Map掃描（GRE，TR=100，F(xiàn)A=40，F(xiàn)OV=10×10cm，矩陣160×128，NEX 6），完成掃描后以HE染色、Masson三色染色、透射電鏡觀察兩種肝纖維模型肝臟病變，并對其纖維化程度和炎癥進行分級分期。掃描圖像經(jīng)AW4.2工作站后處理，分別測量兩種肝纖維化R2*值并與火焰原子光譜法測定肝鐵含量相對照，并與病理分級行相關(guān)性分析，采用SSPS13.0進行統(tǒng)計分析，顯著水平取0.05。
　　 結(jié)果

13、:病理學(xué)證實兩種肝纖維化模型均發(fā)生肝纖維化改變，兩種模型纖維化程度分布相似，但是炎癥評分肝纖維化鼠明顯高于肝纖維化兔，具有統(tǒng)計學(xué)意義，肝纖維化鼠鏡下脂肪變較肝纖維化兔明顯。采用Spearman’s法對肝鐵鐵含量和R2*值行相關(guān)性分析，兩者呈明顯正相關(guān)，r=0.966，P＜0.01，肝纖維化鼠模型肝鐵含量明顯高于肝纖維化兔模型，而兩者的對照組差別不大。兩種肝纖維化模型R2*值較對照升高，并具有統(tǒng)計學(xué)意義。肝纖維化兔R2*值隨模型進展時間升

14、高，并與肝纖維化分級呈正相關(guān)（r=0.807，P＜0.01）。
　　 結(jié)論:兩種肝纖維化模型R2*值較對照升高，R2*值可成為定量評價肝纖維化模型鐵沉積指標(biāo)。肝纖維化鼠模型肝鐵含量較肝纖維化兔模型高，可能與其炎癥和脂肪變程度較重相關(guān)。
　　 第五部分:目的:利用T2*Map掃描研究肝鐵含量并與火焰原子光譜法測定肝鐵含量相對照，初步探討了T2*Map對肝鐵含量進行定量研究的可行性及應(yīng)用價值。
　　 方法:肝內(nèi)占位2

15、6例患者術(shù)前三天內(nèi)行T2*Map掃描（FGRE，TR=100，F(xiàn)A=40，F(xiàn)OV=40×40cm，層厚7mm，層間距1mm，矩陣160×128，NEX 2）。掃描圖像經(jīng)AW4.2工作站后處理，分別測量肝內(nèi)腫瘤及腫瘤旁肝組織R2*值并與火焰原子光譜法測定腫瘤旁肝組織鐵含量相對照。采用SSPS13.0進行統(tǒng)計分析，顯著水平取0.05。
　　 結(jié)果:術(shù)后病檢證實原發(fā)性肝癌23例（中低分化11例，中分化8例，中高分化4例），血管瘤1例，