非酒精性脂肪性肝炎患者血代謝組學(xué)的變化.pdf

1、目的:
　　目前隨著非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)在中國(guó)發(fā)病率逐漸升高，尤其是美國(guó)等西方國(guó)家，成為慢性肝病最常見的原因，在中國(guó)上海、廣州、香港等發(fā)達(dá)地區(qū)的患病率也呈上升趨勢(shì)。非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis，NASH)作為該疾病譜中的關(guān)鍵階段，能夠通過無創(chuàng)性手段在早期診斷出NASH是非常必要的。近年來隨著代謝組學(xué)的發(fā)展，

2、利用代謝組學(xué)及其研究平臺(tái)對(duì)NASH的代謝輪廓進(jìn)行分析成為熱點(diǎn)，本研究基于此，運(yùn)用串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)，研究代謝組學(xué)在NASH與非酒精性脂肪肝(nonalcohohc fatty hver，NAFL)血液中的差異，尋找可用于早期診斷的潛在代謝標(biāo)志物。
　　方法:
　　收集NASH及NAFL患者各30例，運(yùn)用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(liquid chromatography-tandem mass spectrometry，LC-MS/MS

3、)技術(shù)，對(duì)采集的干血濾紙片樣品進(jìn)行檢測(cè)，通過主成分分析法(PCA)及正交偏最小二成分析法(OPLS)對(duì)獲取的代謝數(shù)據(jù)進(jìn)行多維統(tǒng)計(jì)分析，并構(gòu)建PCA及OPLS-DA模型。利用OPLS-DA模型所得的變量投影重要性值(variable importance in the projection，VIP)的大小，初步篩選代謝物，結(jié)合獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)及Mann-Whitney U檢驗(yàn)進(jìn)一步篩選潛在代謝標(biāo)志物，同時(shí)通過非參數(shù)檢驗(yàn)分析血代謝組學(xué)的變化。

4、將篩選的代謝物使用二元Logistic回歸后行ROC分析，計(jì)算曲線下面積(AUC)評(píng)估它們對(duì)NASH診斷的價(jià)值。
　　結(jié)果:
　　NASH組和NAFL組血液代謝物比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，兩組之間共計(jì)有30種代謝物有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，p＜0.05?？梢姳彼?、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、同型半胱氨酸、谷氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、鳥氨酸、羥丁?；鈮A、甲硫氨酸/苯丙氨酸、鳥氨酸/瓜氨酸、丙?；鈮A/乙?；鈮A、異戊?；鈮A/乙?；鈮A、羥異

5、戊?；鈮A/辛?；鈮A、羥異戊酰基肉堿/游離肉堿、辛?；鈮A/葵?；鈮A水平在NASH患者中升高，而戊二?；鈮A、肉豆蔻二?；鈮A、肉豆蔻烯?；鈮A、精氨酸/鳥氨酸、甲硫氨酸/亮氨酸、苯丙氨酸/絡(luò)氨酸、乙?；鈮A/游離肉堿、戊二?；鈮A/羥異戊?；鈮A、戊二酰基肉堿/棕櫚?；鈮A、肉豆蔻烯?；鈮A/棕櫚?；鈮A、丙二?；鈮A、己二?；鈮A、戊二?；鈮A/辛?；鈮A在NASH組下降。患者血中總共檢測(cè)了58種代謝物，進(jìn)行多維統(tǒng)計(jì)分析，構(gòu)建P

6、CA(R2X=0.468,Q2=0.196)及OPLS-DA模型(R2X=0.653,R2Y=0.74,Q2=0.454),根據(jù)VIP＞1.5值選出了6種在NAFL組與NASH組見有顯著差異特征代謝物，結(jié)合獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)及Mann-Whitney U檢驗(yàn)，最終篩選出Leu、Ala、Asp、Glu、Om這5種差異代謝物，并且其AUC均大于0.6，聯(lián)合診斷后AUC達(dá)0.932，靈敏度為83.3％，特異度為93.3％。
　　結(jié)論: