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文檔簡(jiǎn)介
1、背景:非酒精性脂肪性肝病(Nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)是指除外飲酒及其他已知傷肝因素(病毒、免疫、遺傳等),以肝細(xì)胞脂肪變?yōu)樘卣鞯呐R床綜合征,包括預(yù)后良好的單純性脂肪肝(nonalcoholic fattyliver,NAFL)、非酒精性脂肪性肝炎(Nonalcoholic steatohepatitis,NASH)、肝纖維化、肝硬化、終末期肝病及肝癌。NAFLD通常無(wú)癥狀,在中國(guó)發(fā)達(dá)地
2、區(qū)的患病率已超過(guò)30%,大部分脂肪肝患者穩(wěn)定在單純性脂肪肝,而大約20%的患者存在肝臟炎癥,并有可能進(jìn)展為肝硬化甚至肝癌[1-3]。NASH是單純性脂肪肝進(jìn)展為各階段肝臟病變的關(guān)鍵環(huán)節(jié),盡管糖尿病、肥胖、高脂血癥被認(rèn)為是肝臟疾病進(jìn)展的危險(xiǎn)因素,但引起疾病進(jìn)展的確切機(jī)制尚不明確。隨著研究的積累,腸道菌群與肝損傷之間的關(guān)系在脂肪肝進(jìn)展中的作用逐漸明確[4],通過(guò)氫呼氣實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)NASH患者存在小腸細(xì)菌過(guò)增長(zhǎng)[5]。由于NAFLD與酒精性肝炎肝
3、臟病理表現(xiàn)的極為相似,且NAFLD患者呼氣中的乙醇含量較正常人升高[5],然而并非所有的飲酒者及NAFLD患者均會(huì)發(fā)生肝臟炎癥。乙醇的代謝產(chǎn)物乙醛對(duì)肝臟的損傷遠(yuǎn)高于乙醇,乙醛對(duì)小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞的致死毒性遠(yuǎn)高于乙醇,且乙醇的部分毒性來(lái)源于乙醇的第一代謝產(chǎn)物乙醛[6]。推測(cè)乙醇代謝障礙可能較內(nèi)源性酒精增多在NAFL進(jìn)展為NASH的機(jī)制中起著更為重要的作用,而腸道菌群紊亂可能為始動(dòng)因素。乙醇脫氫酶及乙醛脫氫酶是乙醇代謝的關(guān)鍵酶,細(xì)胞色素P45
4、02E1具有部分乙醇脫氫酶活性(約占總活性的20%),測(cè)定血清中乙醇脫氫酶和乙醛脫氫酶的活性,可在一定程度上反映內(nèi)源性酒精的代謝狀況。
目的:
1通過(guò)糞便涂片及培養(yǎng),比較NASH組、NAFL組及健康對(duì)照(NORMAL)組在腸道菌群數(shù)量及種類(lèi)上是否存在差異。
2通過(guò)測(cè)定人血清乙醇脫氫酶、乙醛脫氫酶活性,確定NASH患者是否存在內(nèi)源性酒精代謝障礙。
3明確內(nèi)源性酒精代謝障礙與腸道菌群之間的關(guān)系。
5、> 方法:
1研究對(duì)象與分組:收集河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院體檢中心2013年7月至2013年9月體檢診斷為脂肪肝且無(wú)飲酒史或飲酒量低于酒精肝診斷標(biāo)準(zhǔn)的患者及健康對(duì)照者共89例。依據(jù)生化檢查及腹部超聲檢查,分為①NASH組:ALT>40U/L,腹部超聲顯示:肝臟回聲減低者33例;②AFL組:ALT<40U/L,肝臟回聲減低者27例;③NORMAL組:肝功能正常,肝臟回聲正常者29例。
2實(shí)驗(yàn)方法:收集研究對(duì)象的糞便進(jìn)行細(xì)
6、菌涂片革蘭染色及定量細(xì)菌培養(yǎng)。ELASA法檢測(cè)血清乙醇脫氫酶、乙醛脫氫酶活性。采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
結(jié)果:
1糞便涂片計(jì)數(shù)顯示:NASH組腸道菌群豐度(162±5個(gè)/油鏡視野)略低于NAFL組(404±25個(gè)/油鏡視野,P<0.001),兩組均明顯低于正常對(duì)照組(2573±230個(gè)/油鏡視野,P<0.001),且NASH組和NAFL組與NORMAL組相比,革蘭陽(yáng)性菌的數(shù)量明顯降低,革蘭陰性桿菌數(shù)
7、量明顯上升,革蘭陽(yáng)性球菌的數(shù)量略有上升。
2糞便培養(yǎng)顯示:與NORMAL組相比,NASH組與NAFL變形桿菌及腸球菌明顯增多(9.54±0.186 vs9.15±0.23 vs8.69±0.21,P<0.001;7.64±0.61 vs7.86±0.51,P<0.001),雙歧桿菌、擬桿菌明顯減少(8.91±0.33 vs8.86±0.29 vs9.17±0.31, P<0.003;8.93±0.30 vs8.90±0.24
8、vs9.19±0.18,P<0.001)。NASH組變形桿菌增加較NAFL組更為明顯(P=0.008),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
3乙醛蓄積發(fā)生率在NASH組(81.8%)明顯高于NAFL組(55.6%)(P<0.05)及NORMAL(58.5%)組(P<0.05),而在NAFL與NORMAL組無(wú)明顯差異(P>0.8)。
4變形桿菌增多與乙醛蓄積成正相關(guān)關(guān)系,Spearman相關(guān)系數(shù)為0.504(P<0.001),其余3
9、種細(xì)菌與乙醛蓄積無(wú)明顯相關(guān)性。
5變形桿菌與ALT之間具有正相關(guān)關(guān)系,Spearman相關(guān)系數(shù)=0.755,其他三種菌群數(shù)量與ALT之間無(wú)線性關(guān)系。
結(jié)論:
1 NASH及NAFL組腸道菌群豐度均低于NORMAL組,NASH組降低更明顯,說(shuō)明腸道菌群豐度降低可能是NAFLD發(fā)生及發(fā)展的促進(jìn)因素。
2變形桿菌、腸球菌增多,雙歧桿菌、擬桿菌減少,可能與NAFL的發(fā)生有關(guān),而變形桿菌增多可能與NAFL進(jìn)
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